遗传病的诊断与治疗lsy.pptVIP

针对直接病因诊断1特异性强，灵敏度高2适应性强，诊断范围广3目的基因是否处于活化状态均可，无组织和发育特异性。4在感染性疾病的基因诊断中，可检测正在生长的病原体或潜伏病原体。5分子诊断的特点分子诊断的材料可以是任何有核细胞，包括：外周血白细胞、口腔粘膜细胞活检标本、石腊包埋的组织块沉淀细胞（唾液、痰液、尿液）羊水细胞、绒毛细胞、进入母体循环的胎儿细胞(应用PCR，样本可微量化到一个细胞)分子诊断的基本技术限制性片段长度多态性分析（RFLP）核酸杂交(Southern)聚合酶链反应(PCR)DNA测序基因芯片技术其它常用的技术PCR-RFLP（2）PCR-ASOPCR-SSCPSouthern印迹杂交原理基因组DNA01DNA片段02杂交03结果分析04酶切05探针06Southern流程07Southernblottingα1probeSouthern诊断示例：?-地中海贫血020103α2α2kbBamHIkbBamHISouthernblottingαα/αααα/α-αα/--α-/----/--14kb10kb正常缺1缺2缺3缺4Southern诊断结果分析RFLP原理RFLP:RestrictionFragmentLengthPolymorphism限制性片段长度多态性Southern-RFLPMstII识别序列MstII1.2kbCCTGAGGCCTGTGGprobe1.4kbxRFLP诊断:镰状细胞贫血症0.2kbkbkbβΑ/βΑβΑ/βSβS/βS正常镰状镰状贫血Southern-RFLP结果分析PCR原理KaryMullispolymerasedNTPsPCR-RFLP镰状细胞贫血(HbS)：第5～7位密码子?A?A?A?S?S?SMstⅡ:CCTNAGG1.2Kb0.2Kb1.40Kb1.20Kb0.20Kb?A:CCTGAGGAG?S:CCTGTGGAGPCR-ASOASO:allele-specificoligonucleotide,等位特异性的寡核酸探针PCR-ASO正常人病人1正常探针2突变探针3正常探针：5’－AAGGCTTAGCTTAGCTTTGGACC突变探针：5’－AAGGCTTAGGTTAGCTTTGGACC4ASO点杂交检测基因突变举例5PCR-SSCP原理SSCP:SingleStrandConformationPolymorphism,单链构象多态性PCR-SSCP示例DNA芯片ADNA测序BFISHCFISH原理FISH应用示例Y染色体18号染色体X染色体13号染色体21号染色体利用FISH技术检测染色体易位利用FISH技术检测21-三体(R)和13(G)染色体FISH应用示例分子诊断方法具有无限广阔的应用前景，随着技术的不断进步和诊断成本的不断降低，临床应用越来越广泛。目前限制分子诊断应用的主要因素有：大部分遗传相关性疾病的致病基因还未明确，特别是多基因疾病和具有遗传异质性的疾病；成本较高、周期较长；遗传学和分子生物学知识还未得到广泛的普及。分子诊断的限制因素第18章遗传病的治疗本章主要内容：一般原则，传统方法，基因治疗。遗传病治疗的原则遗传病致病的特殊性导致了其治疗方法的困难，因此大多数遗传病至今没有理想的方法，应以预防为主。目前，遗传病的临床治疗只能暂时控制病症的发展，长远效果不理想。遗传病治疗有常规治疗和基因治疗两种。前者一般只能改善其表型，而后者为遗传病治疗带来了