实验二细胞的超微结构—透射电镜下的细胞器.pptxVIP

实验二细胞的超微结构——透射电镜下的细胞器;一、实验目的;二、实验原理;透射电子显微镜的特点是分辨率高，已接近或达到仪器的理论极限分辨率（点分辨率0.2~0.3nm，品格分辨率0.1~0.2nm）；放大倍率高，变换范围大，可从几百倍到数十万倍（最高已达到80万倍）；图像为二维结构平面图像，可以观察非常薄的样品（样品厚度为50nm左右）；样品制备的超薄切片为主，操作比较复杂。

透射电镜适用于样品内部显微结构及样品外形（状）的观察，也可进行纳米样品粒径大小的测定。;（二）透射电子显微镜的结构及作用

透射电镜由电子光学系统、真空系统和供电系统三大部分组成。

1．电子光学系统：此系统包括电子枪，即电子发射源。电子枪系由阴极、栅极、阳极三个电极组成的静电系统，经50~120kV的电压加速，成为高速电子流投向聚光镜。聚光镜的作用是将电子枪中射出的电子束聚焦，以最小的损耗递送到样品上。样品室的作用是承载样品。样品室还有一个气锁装置，使在更换样品后数秒钟内即可恢复至正常工作的真空状态。;物镜是电镜的关键部件，它决定了电镜的分辨能力，对成像的质量起决定性作用。此外还有中间镜，结构和物镜类似，作用是将经物镜放大的电子像再作二级放大。位于中间镜之下的投影镜，是一个高倍率强透镜。此外就是成像的荧光屏和观察室以及照相装置。

;2．真空系统：电镜的镜筒空间部分是电子束的通道，不许有任何游离的气体存在，工作时必须要保持绝对真空。真空系统通常包括机械泵、空气过滤器、油扩散泵及排气管道等部件。

3．供电系统：高性能的电镜供电系统包括安全系统、总调压器、真空电源、透镜电源、高压电源及辅助电源系统。;（三）透射电镜超薄切片制备方法及基本过程

超薄切片制备样品的基本过程分为取材、固定、漂洗、脱水、渗透、聚合、切片染色等几个环节。其中固定剂通常采用锇酸或戊二醛，以树脂为包埋剂，用玻璃刀作超薄切片后，捞取在铜网上，再用重金属染色法染色后即可制成观察标本。

透射电镜超薄切片样品制备还需要做支持膜的制作、玻璃刀的制作、包埋块的修正、切片的特殊染色等过程。;此外就是成像的荧光屏和观察室以及照相装置。

电子显微镜是以短波长的电子束为照明源，用电磁透镜成像，并与特定的机械装置、电子和高真空技术相结合所构成的现代化大型精密电子光学仪器。

观察生物电镜样品，在透射电镜下识别、掌握各种细胞器的亚显微结构。

多核糖体的透射电镜照片

2．真空系统：电镜的镜筒空间部分是电子束的通道，不许有任何游离的气体存在，工作时必须要保持绝对真空。

图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构

透射电镜超薄切片样品制备还需要做支持膜的制作、玻璃刀的制作、包埋块的修正、切片的特殊染色等过程。

利用电磁透镜可对电子束进行聚焦、放大和成像

透射电镜适用于样品内部显微结构及样品外形（状）的观察，也可进行纳米样品粒径大小的测定。

简述透射电镜观察的基本要领。

透射电镜由电子光学系统、真空系统和供电系统三大部分组成。

1．电子光学系统：此系统包括电子枪，即电子发射源。

3nm，品格分辨率0.

2．学习在透射电镜下观察样品的超微结构。

（三）透射电镜超薄切片制备方法及基本过程

使用段波长的入射电子束与样品作用后产生的透射电子（主要是散射电子）为信号，通过电磁透镜将其聚焦成像，并经过多级放大后，在荧光屏上显示出反映结构信息的电子图像。

真空系统通常包括机械泵、空气过滤器、油扩散泵及排气管道等部件。

（三）透射电镜超薄切片制备方法及基本过程

电子显微镜是以短波长的电子束为照明源，用电磁透镜成像，并与特定的机械装置、电子和高真空技术相结合所构成的现代化大型精密电子光学仪器。

在老师的指导下学习超薄切片的制备方法及基本过程，并用透射电镜观察动植物样品。

放大倍率高，变换范围大，可从几百倍到数十万倍（最高已达到80万倍）；

1．观摩学习超薄切片的制备方法及基本过程。

透射电镜适用于样品内部显微结构及样品外形（状）的观察，也可进行纳米样品粒径大小的测定。

其中固定剂通常采用锇酸或戊二醛，以树脂为包埋剂，用玻璃刀作超薄切片后，捞取在铜网上，再用重金属染色法染色后即可制成观察标本。

电子显微镜是以短波长的电子束为照明源，用电磁透镜成像，并与特定的机械装置、电子和高真空技术相结合所构成的现代化大型精密电子光学仪器。

简述透射电镜的工作原理。

2．真空系统：电镜的镜筒空间部分是电子束的通道，不许有任何游离的气体存在，工作时必须要保持绝对真空。

比较透射电镜与普通光镜的结构特点。

样品制备的超薄切片为主，操作比较复杂。

图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构;四、实验内容;五、实验步骤;在透射电镜下，可