临床免疫学检验PPT课件 临床免疫检验新技术.pptx

;;;PART

ONE;基本结构

1.进样雾化系统主要通过将细胞雾化形成单细胞液滴，再逐一将细胞送入离子源系统。

2.离子源包括加热气化室和电感耦合等离子体焰炬（ICP火焰炬）。加热气化室是将进样系统中雾化的单细胞液滴气化，电感耦合高频等离子体焰炬主要将气化后的细胞中标记的金属元素电离形成离子云。

3.离子传递和过滤系统主要将电离的离子传递到飞行质谱检测器（ICP-TOF）中检测，并过滤去除杂质。

4.ICP-TOF装置主要对气化的金属元素的离子进行检测。

5.计算机及数据处理分析系统主要记录单个细胞中各个标记物元素含量的检测结果，并将这些数据转换为标准的流式数据进行展示。;技术原理;实验要点

（一）靶蛋白列表的设计

最重要的是需考虑研究目标和欲解决的科学问题，最经典的方法是根据专业背景知识或者文献资料进行筛选。

（二）抗体-金属同位素配对

优化抗体与金属同位素的配对能够确保最佳信号强度与最小信号重叠，此步骤是实验的关键。

（三）组别的拆分

运用质量标签细胞条形码技术可以提高样本通量、降低成本并提高数据质量。;（四）标记抗体

目前的方式主要有两种，一种是预标记抗体，另一种是使用金属标记试剂盒对抗体进行标记。

（五）数据分析

机器的输出数据采用流式细胞术标准文件（FCS文件）的形式，亦可采用生信分析软件进行降维或聚类分析。;技术特点;PART

TWO;;第二节流式荧光检测技术;方法学评价——常用免疫检测反应模式

1.遵循体外血清学反应的基本特点

2.抗原-抗体反应模式

双抗体夹心法；

抗原竞争法；

间接法。;方法学评价——技术特点及检测应用

1.方法学灵敏度高

可达pg/ml水平或更低。

2.线性范围广、检测重复性好。

3.检测样本用量少；可同步完成多参数的检测。

微量样本就可同步完成十几种、几十种，甚至上百种待测抗原或抗体的检测。

4.检测对象可以是抗体（包括自身抗体）、细胞因子、趋化因子、肿瘤标志物等抗原物质。;PART

THREE;康复原则;基于微阵列的单分子免疫检测技术;基于微液滴的单分子免疫检测技术;微阵列与微流控技术比较;影响因素;;谢谢