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细胞分子生物学.pptVIP

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两条呼吸链CN—、CO03抗霉素A02鱼藤酮、阿米妥01氧化还原的本质是电子的转移。氢原子的转移其本质也是电子转移,H原子可分解为H+和e-。氧化磷酸化:当电子从NADH或FADH2传递给氧形成水时,同时伴有ADP磷酸化形成ATP的过程即为氧化磷酸化。NADH呼吸链生成ATP的3个部位:(1)NADH至辅酶Q;(2)细胞色素b至细胞色素c;(3)细胞色素aa3至氧之间。第一节线粒体与氧化磷酸化II氧化磷酸化与电子传递的偶联各种假说:化学偶联假说,构象偶联假说,化学渗透假说。实验证明:偶联机制在生化上来说是向量的,在功能上来说是渗透的。化学渗透假说已成为氧化磷酸化机制研究中最为流行的一种假说。第一节线粒体与氧化磷酸化氧化磷酸化的偶联机制化学渗透假说第一节线粒体与氧化磷酸化P.Mitchell(1961)提出“化学渗透假说”。认为:呼吸链组分及ATP酶在线粒体内膜上呈不对称分布。电子沿呼吸链传递时,所释放的能量将质子从内膜基质侧(M侧)泵至膜间隙(C侧),形成质子动力势(△P)。△P=Ψ-(2.3RT/F)△pH其中:△pH=pH梯度,Ψ=电位梯度,T=绝对温度,R=气体常数,F为法拉第常数,当温度为25℃时△P的值为220mV左右。在这个梯度驱动下,H+穿过内膜上的ATP合成酶流回到基质,其能量促使ADP和Pi合成ATP。ChemiosmoticTheoryIIIATP合酶(ATPsynthetase)第一节线粒体与氧化磷酸化1是生物体能量转换的核心酶。分别位于线粒体内膜,类囊体膜或质膜上,参与氧化磷酸化和光合磷酸化,在跨膜质子动力势的作用下催化合成ATP。ATP合成酶是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化偶联的关键装置,也是合成能源物质ATP的关键装置。2IIIATP合酶(ATPsynthetase)第一节线粒体与氧化磷酸化状如蘑菇,属F型质子泵。分为球形的F1(头部)和嵌入膜中的F0(基部)。F1由5种多肽组成α3β3γδε复合体,具有三个ATP合成的催化位点(每个β亚基具有一个)。F0由三种多肽组成ab2c12复合体,嵌入内膜,12个c亚基组成一个环形结构,具有质子通道。F0的一个亚基可结合寡霉素,通过该亚基可调节通过F0的H+流,如当质子动力势很小时,它可防止ATP水解;又可起到保护自身和抵抗外界环境变化的作用.logoATP合酶ATP合酶的作用机制第一节线粒体与氧化磷酸化1979年代BoyerP提出构象耦联假说(结合变构机制)。其要点如下:1.ATP酶利用质子动力势,发生构象改变,改变与底物的亲和力,催化ADP与Pi形成ATP。2.F1具有三个催化位点,但在特定的时间,三个催化位点的构象不同(L、T、O),与核苷酸的亲和力不同。3.质子通过F0时,引起c亚基构成的环旋转,从而带动γ亚基旋转,由于γ亚基的端部是高度不对称的,它的旋转引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化(L、T、O),不断将ADP和Pi加合在一起,形成ATP(二)、氧化磷酸化抑制剂电子传递抑制剂抑制NADH→CoQ的电子传递。阿米妥、鱼藤酮。抑制复合物III。抗霉素A。抑制复合物IV。如:CO、CN、NaN3、H2S。电子传递抑制剂可用来研究呼吸链各组分的排列顺序,当呼吸链某一特定部位被抑制后,底物一侧均为还原状态,氧一侧均为氧化态,可用分光光度计检测。第一节线粒体与氧化磷酸化(二)、氧化磷酸化抑制剂第一节线粒体与氧化磷酸化2.磷酸化抑制剂与F0结合结合,阻断H+通道。如:寡霉素。3.解偶联剂(uncoupler)解偶联蛋白(uncouplingproteins,UCPs):位于动物棕色脂肪组织和肌肉线粒体,与维持体温有关。质子载体:质子通道:增温素(thermogenin)。其它离子载体:如缬氨霉素。某些药物:如过量的阿斯匹林。线粒体与人的疾病,衰老和细胞调亡有关,线粒体的异常会影响整个细胞的正常功能,从而导致病变。01硒对线粒体膜有稳定作用,患者缺硒而导致心肌线粒体出现膨胀,嵴稀少和不完整;琥珀酸脱氢酶,细胞色素氧化酶和ATP合成酶活性及其对寡霉素的敏感性都有明显降低;膜电位下降,膜流动性减低;对电子传递和氧化磷酸化偶联均有明显影响.02克山病就是一种心肌线粒体病.患者线粒体硒含量明显降低.第一节线粒体与氧化磷酸化03三、线粒体与疾病01绿色植物通过叶绿体(Chloroplast)完成能量转换,利用光能同化二氧化碳和水,合成糖,同时产生氧。绿色植物年产干物质达1014公斤。02光合作用是地球上有机体生存和发展的

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