药品微生物限度检查法.ppt

注意事项**观察供试品MUG管时，可与阳性对照管、阴性对照管同时在366nm紫外灯下观察。在曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂平板上生长的可疑菌落，务必挑选2-3个以上菌落分别做IMViC试验鉴别。在IMViC试验中，以灭菌接种环沾取菌苔，首先接种于枸椽酸盐琼脂斜面上，然后再接种于蛋白胨水等其它培养基上，切务将培养基带入枸椽酸盐琼脂斜面上，以免产生假阳性结果。大肠菌群**大肠菌群作为水质粪便污染的指示菌已有80多年历史。大肠菌群的定义：是指37℃生长时能发酵乳糖，在24h内产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌，符合上述定义的细菌除大肠埃希氏杆菌属外，还包括肠杆菌科的肠杆菌属、枸椽酸菌属、克雷伯菌属等，实际上基本包括人和了正常家畜肠道内的全部需氧的革兰阴性杆菌，较大肠埃希菌更具代表性，且存活时间较长。故检出大肠埃希菌，一般认为药品受粪便的近期污染；而检出大肠菌群，则表示药品受粪便的近期或远期污染。以大肠菌群作为口服药品微生物限度标准的控制菌，具有广泛的卫生学意义，更能反映药品的卫生质量。操作方法**取乳糖胆盐发酵管3支，分别加入1:10供试液1ml(供试品量0.1g或0.1ml),1:100供试液1ml(供试品量0.01g或0.01ml),1:1000供试液1ml（供试品量0.001g或0.001ml），同时作阴性对照，各管置36±1℃培养18-24h,阴性对照应无菌生长。结果判断**乳糖胆盐发酵管若无菌生长，或有菌生长但不产酸产气（或产酸不产气）→报告未检出大肠菌群；如有产酸产气，应做确证试验，将产酸产气的发酵管划线接种于EMB或麦康凯琼脂平板上培养18-24h，如平板上无菌落生长可判该管未检出大肠菌群。如平板上有菌落生长并与药典所列的菌落形态特征相符或疑似，镜检为革兰阴性无芽孢杆菌的菌落，应取上述平板上的可疑菌落4-5个各接种1支乳糖发酵管，培养24－48h,凡产酸产气，革兰阴性无芽孢杆菌，判该管检出大肠菌群，反之判该管未检出大肠菌群。沙门菌检验程序**供试品10g(10ml)

↓200ml的营养肉汤中

↓35~37℃18~24h四硫磺酸盐增菌液

↓35~37℃18~24hDHL，EMB或MacC↓35~37℃18~24h┌────────────┐无典型菌落三糖铁琼脂（TSI）