阳离子交换树脂.ppt

离子交换法提取分离天然酸性有机化合物例1甘草酸是甘草的有效成分可先用阴离子交换树脂（OH型）富集甘草酸，以4-6%氨水洗脱后，再用弱酸性阳离子交换树脂（H+）除去铵离子，可得到高纯度的甘草酸。例2为纯化粘康酸（己二烯二酸），克使发酵液依次通过吸附树脂DiaionHP20柱和强酸性阳离子交换树脂DiaionSK102柱先除去杂质，然后吸附在弱碱性阴离子交换树脂柱上，经水洗涤后，以稀氢氧化钠溶液解吸，产物的收率为95%，纯度达到99.6%。四、离子交换树脂法分离纯化核苷酸及核酸核苷酸及脱氧核苷酸为两性化合物，含有可形成阳离子的碱基和可形成阴离子的磷酸基，因此用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂皆可对其进行分离和纯化。脱氧核糖核酸酶解后，水解产物吸附在#201×7或#201×4（OH-型）阴离子交换树脂上，用0.2盐酸洗脱，洗脱液经一系列后处理，得到四种脱氧核苷酸钠的混合物（即5’-dAMP-Na、5’-dTMP-Na、5’-dCMP-Na、5’-dGMP-Na）将四种核苷酸混合物的水溶液通过弱酸性阳离子交换树脂柱，以水洗脱，分部收集，可依次分离出纯的5’-dAMP-Na、5’-dTMP-Na、5’-dCMP-Na、5’-dGMP-Na。离子交换法提取分离氨基酸氨基酸是一类含有氨基和羧基的两性化合物，在不同的PH条件下能以阳、阴或两性离子的形式存在。因此，应用阳离子交换树脂和阴离子交换树脂均可富集分离氨基酸。应用离子交换树脂从蛋白质水解液中提取分离氨基酸的工艺见图1，其中脱酸和脱色的顺序可以互换。树脂脱色法是近年来发展起来的一种新技术，应用HD-I大孔酚醛型弱酸树脂或大孔聚苯乙烯型树脂对猪血粉水解液连续脱色的效果优于活性炭。在酵母水解制备混合氨基酸的工艺中，#732阳离子交换树脂可用于最后的分离纯化步骤。天然蛋白质原料水解水解液脱酸、脱色清液吸附或沉淀除酪氨酸等滤液离子交换饱和树脂柱分部解吸酸性氨基酸中性氨基酸碱性氨基酸分部分离纯氨基酸工艺流程示意图混合氨基酸一般在阳离子交换树脂上分离为纯氨基酸组分，其分离原理是基于树脂对不同氨基酸的选择性。选择性大小的顺序为：碱性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸。当解析时，氨基酸的流出顺序正好相反，酸性氨基酸最后流出树脂柱。决定树脂对氨基酸选择性的另一个重要因素是氨基酸侧链的疏水性。由于大多数树脂的基体是疏水的，因而氨基酸侧链的疏水性越大，它在树脂柱上的保留时间越长。目前，用发酵法可生产谷氨酸、赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、精氨酸、组氨酸、脯氨酸、鸟氨酸、和瓜氨酸等，阳离子交换树脂是从发酵液中提取分离氨基酸的理想分离材料。原料树脂类型分离得到的氨基酸猪血粉#001×7阳树脂AspGluLeuHisLysArg#110，#001×7，D371ArgLysHisPhePheTyr等含COOHSO3H的阳树脂HisLysArg等猪血母液#732阳树脂TyrPhe及混合氨基酸猪毛#732阳树脂Lys等鸡毛#732树脂/#711树脂ProAlaARG等鱼皮鱼鳞阳离子交换树脂Pro等用离子交换树脂分离混合氨基酸的一些实例列于表1氨基酸可用多种液相色谱模式分离。在pH小于氨基酸pK的酸性溶液中，氨基酸的氨基带正离子，可采用阳离子交换色谱法；在pH大于氨基酸pK的碱性溶液中，氨基酸的氨基带负离子，可采用阴离子交换色谱法；当pH等于氨基酸的等电点时，氨基酸为中性离分子，可采用正相或反相HPLC。阳离子交换色谱法分离氨基酸的应用实例较多，多数氨基酸分离仪采用的就是阳离子交换色谱柱。下图是19种氨基酸在阳离子交换色谱柱上的分离色谱图.色谱条件：阳离子交换树脂#2622（4.6mmi.d.×60mm）；茚三酮柱后衍生检测，检测波长570nm；进样量10uL。糖类化合物分子中含有许多醇羟基，只有极弱的酸性，如葡萄糖的离解常数仅6.6×10-13，但在中性水溶液中仍能与强碱性阴离子交换树脂（OH-型）发生离子交换作用而被吸附，并易被10%NaCl水溶液解析。可惜许多糖类物质在强碱性条件下会发生异构化和分解反应，因而限制了OH-型强碱性阴离子交换树脂在糖类物质分离纯化中的应用。由于多羟基化合物与钙盐、钡盐有较强的亲和力，因此发展了另一种离子交换树脂法，用于糖类化合物的分离纯化。将磺化聚苯乙烯型阳离子交换树脂转化为钙型，用作固定相，可分离葡萄糖和果糖、木糖醇和山梨醇等。12六、离子交换树脂法纯化糖类化合物（1)树脂粒度小颗粒树脂总是相应于大的交换速度。颗粒均匀的树脂比颗粒不均匀的树脂的交换速度高。（2)树脂交联度树脂交联度越大，树脂的溶胀性越