细胞培养缩减版.ppt

实验六

细胞培养技术

生物教研室朱力宇实验原理01体外培养（Invitro）*细胞培养：指从体内取出组织、细胞在体外模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定的营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能特性。原代培养：直接取材于有机体组织的细胞培养。传代培养：将培养细胞转移到新的容器中，以1：2的比例继续培养。一、什么是细胞培养？制备游离细胞悬液胰蛋白酶、胶原酶、EDTA，破坏细胞间连接分离出不同类型的细胞原代培养传代培养细胞培养细胞分离1、离心2、利用细胞自身的黏附力3、抗体吸附4、流式细胞仪（FCM）5、其他生化分析培养细胞的生长方式及类型贴附生长型细胞悬浮生长型细胞成纤维样细胞上皮样细胞：都可连成单层悬浮生长型细胞三、培养细胞的条件营养需要3无毒及无污染2环境要求生存环境温度01.气相02.PH03.仪器及耗材02细胞培养室超净工作台CO2培养箱CO2培养箱设定的条件为37℃，5％CO2。提供的3个环境：温度，气体，湿度CO2培养箱超净工作台倒置相差显微镜倒置显微镜培养瓶和培养板培养基及试剂03消化液培养基血清污染问题1.支原体污染扫描电镜法显示支原体，附于细胞表面众多的圆形颗粒为支原体细菌污染:能改变培养液的pH值，使培养液变混浊。细菌生长迅速，能消耗营养液和产生毒素。抑制细胞的生长，毒性大的细菌可很快导致细胞崩解死亡。01细菌01细胞013.真菌污染实例04