霉菌和酵母计数.ppt

培养基、试剂明胶磷酸盐缓冲液10%胰酶水溶液（酶活力1：250）庖肉培养基卵黄琼脂培养基肉毒分型抗毒诊断血清革兰氏染色肉毒梭菌及肉毒毒素检验可疑食物病人血清在未使用抗毒素治疗前采集（4-5ml）病人粪便疑似患者外伤感染后的坏死组织或者是渗出液01020304样品采集：肉毒梭菌及肉毒毒素检验01增菌（产毒培养）02分离培养03菌落特征及菌体形态04菌落特征及菌体形态05生化试验06肉毒毒素检验（小白鼠腹腔注射）肉毒梭菌及肉毒毒素检验菌落特征及菌体形态01普通琼脂平板上形成直径3-5mm不规则菌落、半透明、绒毛样边缘扩散生长02血平板上形成发丝状或盘状的灰色菌落有β-溶血03卵黄琼脂平板菌落及周围培养基上能分解脂肪表面覆盖着特有的虹彩样薄层和珠光层04肉毒梭菌及肉毒毒素检验01生化试验02肉毒梭菌的生化反应变化很大，同一型各菌株之间也不完全一致。肉毒梭菌及肉毒毒素检验肉毒梭菌及肉毒毒素检验分纯后主要生化鉴定明胶硫化氢硝酸盐葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖++－++—+肉毒毒素检验（小白鼠腹腔注射）标本处理接种量小白鼠数结果上清液+10%胰酶水溶液（9：1）37℃1小时0.5ml4只4h死亡上清液+缓冲液煮沸10分钟0.5ml4只存活庖肉增菌48小时15分钟/2000转，取上清液0.5ml4只4h死亡上清液0.5ml4只6h死亡上清液稀释50倍0.5ml2只16h死亡上清液稀释500倍0.5ml2只20h死亡上清液稀释5000倍0.5ml2只存活明胶磷酸盐缓冲液（对照组）0.5ml2只存活定型试验标本处理（抗毒素1ml+9ml上清液1：201ml）接种量小白鼠数结果A-F混合型肉毒抗毒素0.5ml4只存活A型肉毒抗毒素0.5ml4只12h内死亡B型肉毒抗毒素0.5ml4只存活E型肉毒抗毒素0.5ml4只7h内死亡对照组：上清液+缓冲液（1：1）煮沸10分钟0.5ml2只存活对照组：上清液+缓冲液（1：1）0.5ml2只5h内死亡标本中的肉毒毒素可被肉毒多价抗毒素和B型抗毒素中和起到保护小白鼠免于死亡的作用。01上清液煮沸10分钟可以破坏肉毒的毒素证明标本中含有毒素。02此次样品检出结果为B型肉毒毒素03定型试验说明01范围05培养基和试剂04设备和仪器02规范性引用文件03术语与定义06检验步骤07结果判定罐头食品商业无菌的检验概念：罐藏食品是将原料经过预处理、装罐、杀菌、密封后而成。因罐内保持一定的真空度，所以合格产品的罐盖和罐底是平的或向内凹陷。罐藏食品的分类：罐藏食品可根据酸性的不同，分为低酸性罐头（动物性原料制成的罐头，蛋白质含量高）、中酸性罐头、酸性罐头、高酸性罐头（植物性原料制成的罐头，碳水化合物含量高）罐藏食品的特性01罐藏食品变质的原因：02化学因素：如罐头容器的马口铁与内容物相互作用引起的氢膨胀（主要发生于中酸性罐头）03物理因素：如温度过高或排气不良，造成的金属容器腐蚀穿孔。04微生物因素:罐内残留的微生物（多是产芽孢的耐热微物），漏罐后的微生物再次污染罐藏食品变质的原因商业无菌：食品经过杀菌处理后，按照所规定的微生物检验方法，在所检食品中无活的微生物检出，或者只能检出极少数的非病原微生物，但他们在食品的保藏过程中不可能生长繁殖，这种从商品角度对某些食品提出的灭菌要求，称为商业无菌12酸败：食品中的碳水化合物或脂肪被微生物分解产酸而败坏，称为腐败。3腐败：食品中的蛋白质被微生物分解造成的败坏，称为腐败。常用的几个概念中温芽孢细菌中温芽孢细菌的最适生长温度是37℃，包括需氧和厌氧两大类，他们的少数芽孢耐过高压蒸汽处理而存活下来。不产芽孢细菌引起的食品腐败变质不产芽孢的细菌不耐热，因此罐头中出现此类菌时，主要是由于漏罐而造成的（冷却水是重要的污染源）。罐头中污染的不产芽孢细菌主要有两类，一类是肠道细菌，另一类是嗜热链球菌、乳链球菌、粪链球菌等，他们分解糖类化合物产酸产气，变质时使罐头膨胀。***********************

食品卫生微生物学检验

GB/T4789-20031、霉菌和酵母计数2、肉毒梭菌及肉毒毒素检验3、罐头食品商业无菌的检验4、乳酸菌检验