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(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN104531747A

(43)申请公布日2015.04.22

(21)申请号CN201410748914.6

(22)申请日2014.12.09

(71)申请人江南大学

地址214122江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号

(72)发明人饶志明秦敬儒徐美娟张显杨套伟

(74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

C12N15/77

C12N15/66

C12N1/21

C12P13/10

C12R1/15

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种通过引入聚-β-羟基丁酸酯代谢

途径提高钝齿棒杆菌L-精氨酸产量的方法

(57)摘要

通过引入PHB代谢途径到

CorynebacteriumcrenatumSYPA中，从而

高产L-精氨酸，属于基因工程和生物工程

领域。该发明酶切质粒pBHR68获得合成

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PHB的操纵子，与棒杆菌表达载体pDXW-

10连接，并将其在C.crenatumSYPA中表

达，为国内外首次通过引入PHB代谢途径

在野生型钝齿棒杆菌中高产L-精氨酸。对

构建的基因工程菌株进行酶活力测定及胞

内辅酶水平研究证明C.crenatum

SYPA/pDXW-10-phbCAB合成L-精氨酸的

能力得到加强。最终在30℃，pH7.0及

600rpm条件下，C.crenatumSYPA/pDXW-

10-phbCAB在5-L发酵罐发酵96h可产得

43.21g/L的L-精氨酸，为国内外首次通过

引入PHB代谢途径到菌体内，调节胞内代

谢网络，最终实现高产L-精氨酸的目的，

为微生物工业化生产L-精氨酸提供了基

础。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

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权利要求说明书

1.一种高产L-精氨酸的重组钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum)，其特征在于：

将SEQIDNO：1所示的RalstoniaeutrophaH16的聚-β-羟基丁酸

(PHB)合成操纵子基因phbCAB从pBHR68上酶切下来，连接到

穿梭表达载体pDXW-10，构建成为重组表达质粒pDXW-10-phbCAB并转化至钝

齿棒杆