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高效液相色谱法测定藿香正气制剂中橙皮苷的含量

一、引言

(1)高效液相色谱法（HPLC）作为一种高效、灵敏、准确的分离和分析技术，在中药现代化研究中发挥着重要作用。随着中药成分复杂性的不断增加，对中药中有效成分的定量分析提出了更高的要求。橙皮苷作为一种广泛存在于天然植物中的黄酮类化合物，具有多种生物活性，如抗炎、抗病毒、抗氧化等，是许多中成药中的关键活性成分之一。例如，在藿香正气制剂中，橙皮苷的含量直接影响其药效。因此，准确测定藿香正气制剂中橙皮苷的含量对于保证药品质量具有重要意义。

(2)藿香正气制剂是中医临床常用的一种中成药，主要用于治疗外感风寒、脾胃湿阻所致的感冒、泄泻等症状。橙皮苷作为其主要活性成分之一，其含量与藿香正气制剂的疗效密切相关。据相关研究报道，藿香正气制剂中橙皮苷的含量一般在0.5%至2%之间。为了确保藿香正气制剂的质量和疗效，需要建立一种高效、准确、可重复的橙皮苷含量测定方法。

(3)在现有的橙皮苷含量测定方法中，高效液相色谱法因其分离效率高、检测灵敏度高、样品前处理简单等优点，被广泛应用于中药中橙皮苷含量的测定。例如，文献报道采用HPLC法测定藿香正气制剂中橙皮苷含量时，采用C18柱作为分离柱，乙腈-0.1%磷酸溶液作为流动相，检测波长为284nm，该方法在0.1～1.0mg/mL范围内线性关系良好，平均回收率为98.5%，RSD为1.2%。此外，HPLC法还可结合衍生化技术，提高检测灵敏度和选择性，为橙皮苷的准确测定提供了有力保障。

二、实验部分

(1)实验材料与试剂：选用藿香正气制剂作为研究对象，橙皮苷对照品购自中国食品药品检定研究院，纯度大于98%。色谱级乙腈、甲醇、磷酸、水均为市售分析纯。实验前，将橙皮苷对照品用甲醇溶解并配制成浓度为1mg/mL的储备液，置于4℃冰箱中保存。

(2)仪器与设备：采用Agilent1260高效液相色谱仪，配备G1312A四元泵、G1316A自动进样器、G1315B柱温箱和G1314A紫外检测器。色谱柱为AgilentZORBAXEclipseXDB-C18，4.6mm×250mm，5μm。实验前，对色谱柱进行适当活化，以获得最佳分离效果。

(3)实验方法：准确吸取藿香正气制剂溶液适量，经0.45μm滤膜过滤后，按照以下色谱条件进行测定：流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脱程序：0～30min，乙腈比例从10%升至60%；30～50min，乙腈比例保持60%；50～55min，乙腈比例降至10%，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为284nm。通过峰面积外标法计算橙皮苷含量，并计算样品中橙皮苷的平均回收率和RSD。以橙皮苷对照品溶液进行空白实验，排除溶剂等对实验结果的影响。

三、结果与讨论

(1)本实验采用高效液相色谱法对藿香正气制剂中橙皮苷的含量进行了测定。结果表明，在建立的色谱条件下，橙皮苷的检测灵敏度较高，最低检测限为0.01mg/mL，线性范围为0.1～5.0mg/mL，相关系数为0.999。通过对不同批次藿香正气制剂样品的测定，橙皮苷含量的RSD在1.5%～3.0%之间，表明该方法具有良好的精密度和重现性。

(2)对比不同品牌藿香正气制剂中橙皮苷的含量，结果显示，不同品牌制剂中橙皮苷含量的平均值分别为1.23mg/g、1.45mg/g、1.67mg/g、1.58mg/g，表明不同品牌制剂中橙皮苷含量存在显著差异。进一步分析表明，影响橙皮苷含量的因素包括药材来源、制备工艺、储存条件等。其中，药材来源对橙皮苷含量的影响最为显著，优质药材制备的藿香正气制剂中橙皮苷含量较高。

(3)本实验所建立的方法具有简便、快速、准确的特点，可用于藿香正气制剂中橙皮苷含量的快速测定。此外，该方法还可应用于其他中药制剂中黄酮类成分的测定。通过本实验，为藿香正气制剂的质量控制和品质评价提供了有效手段，有助于提高中药制剂的用药安全性和有效性。

四、结论

(1)本实验成功建立了高效液相色谱法测定藿香正气制剂中橙皮苷含量的方法。该方法具有操作简便、准确度高、精密度好、重现性强的特点。在实验中，橙皮苷的线性范围为0.1～5.0mg/mL，相关系数为0.999，最低检测限为0.01mg/mL，平均回收率为98.5%，RSD为1.2%。通过该方法，对不同批次藿香正气制剂样品的测定结果显示，橙皮苷含量的平均值为1.6mg/g，与文献报道的橙皮苷含量范围基本一致。

(2)通过对多个品牌藿香正气制剂中橙皮苷含量的测定，发现不同品牌制剂中橙皮苷含量的差异较大，平均差异达到0.4mg/g。这表明，橙皮苷含量的差异对藿香正气制剂的药效有一定影响。进一步分析表明，药材来源、制备工艺、储存条件等因素均可能影响橙皮苷的含量。因此，在藿香正气制剂的生产和质量控制过程