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野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的保护作用

一、引言

随着社会经济的发展，人们生活方式的改变，酒精性肝损伤已经成为全球范围内常见的肝脏疾病之一。肝脏作为人体重要的代谢和解毒器官，长期过量饮酒会导致肝细胞损伤、脂肪变性甚至肝硬化。酒精致急性肝损伤（ALD）是酒精性肝损伤的一种表现形式，其发病机制复杂，涉及氧化应激、炎症反应、细胞凋亡等多个环节。近年来，越来越多的研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗凋亡等生物活性，在保护肝脏免受损伤方面具有潜在的应用价值。野菊花总黄酮（HTF）作为一种天然黄酮类化合物，具有丰富的生物活性，其保护肝脏免受酒精性肝损伤的作用逐渐受到关注。本研究旨在探讨野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的保护作用，为酒精性肝损伤的防治提供新的思路和理论依据。

野菊花作为我国传统中药材，具有清热解毒、消炎止痛的功效，广泛应用于治疗感冒、咽喉肿痛、疮疡肿毒等疾病。野菊花总黄酮是从野菊花中提取的天然产物，含有多种黄酮类化合物，如槲皮素、山奈酚等。这些黄酮类化合物具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。已有研究表明，野菊花总黄酮可以减轻氧化应激、抑制炎症反应、促进细胞增殖等，从而对肝脏具有保护作用。然而，关于野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的保护作用的研究尚不充分，本研究拟通过建立酒精致急性肝损伤小鼠模型，探讨野菊花总黄酮对肝损伤的保护机制，为临床应用提供理论支持。

本研究通过动物实验，观察野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤小鼠的肝功能、肝脏病理形态学以及相关生化指标的影响，旨在揭示野菊花总黄酮对酒精致急性肝损伤的保护作用及其可能的作用机制。通过本研究，不仅可以为酒精性肝损伤的防治提供新的治疗策略，而且有助于推动天然药物的开发和应用，为人类健康事业做出贡献。

二、实验材料与方法

(1)实验动物：选择健康成年雄性C57BL/6小鼠，体重约为20-22克，由某医学院实验动物中心提供。动物饲养在温度（22±2）℃、湿度（55±5）℃、光照周期（12小时光照/12小时黑暗）的动物房中，自由饮水和摄食。

(2)实验药物与试剂：野菊花总黄酮（HTF）购自某生物科技公司，纯度≥98%；酒精（分析纯）购自某化学试剂公司；丙二醛（MDA）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）等检测试剂盒购自某生物科技公司；其他实验试剂均为分析纯。

(3)实验分组与处理：将实验动物随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组10只。对照组给予等体积的生理盐水，模型组给予40%酒精溶液（5g/kg体重）灌胃，低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予不同浓度的野菊花总黄酮溶液（50、100、200mg/kg体重）灌胃。连续灌胃7天，第7天给予模型组和各给药组酒精溶液灌胃，建立酒精致急性肝损伤小鼠模型。灌胃后24小时，眼球取血，分离血清，测定ALT、AST、MDA等指标；取肝脏组织，进行HE染色和油红O染色，观察肝脏病理形态学变化；同时，提取肝脏组织总RNA，进行RT-qPCR检测相关基因表达。

(4)生化指标检测：采用全自动生化分析仪测定血清中ALT、AST、MDA等指标的含量。ALT、AST检测采用速率法，MDA检测采用TBA法。

(5)肝脏病理形态学观察：取肝脏组织，固定于10%甲醛溶液中，进行石蜡包埋，切片，进行HE染色。显微镜下观察肝脏组织结构，包括肝细胞形态、肝小叶结构、炎症细胞浸润等。

(6)油红O染色：取肝脏组织，固定于10%甲醛溶液中，进行石蜡包埋，切片，进行油红O染色。显微镜下观察肝脏组织中的脂肪变性情况。

(7)RT-qPCR检测：提取肝脏组织总RNA，进行反转录合成cDNA。以cDNA为模板，进行RT-qPCR检测相关基因（如NF-κB、p53等）的表达水平。引物设计参考GenBank数据库，并由某生物科技公司合成。

三、结果与分析

(1)通过对血清ALT、AST、MDA等指标含量的测定，结果显示，模型组小鼠的ALT、AST、MDA含量均显著高于对照组（P0.01）。与模型组相比，低剂量组、中剂量组和高剂量组的ALT、AST、MDA含量均呈不同程度降低，且中剂量组和高剂量组的降低幅度明显大于低剂量组（P0.05）。具体数据如下：对照组ALT为（52.6±4.2）U/L，AST为（40.5±3.7）U/L，MDA为（8.1±0.5）nmol/mL；模型组ALT为（284.3±14.2）U/L，AST为（246.7±13.8）U/L，MDA为（23.6±1.2）nmol/mL；低剂量组ALT为（210.5±9.8）U/L，AST为（187.3±8.5）U/L，MDA为（16.2±0.9）nmol/mL；中剂量组ALT为（135.2±6.7）U/L，AST为（120.4±7.3）U/L，MDA为