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黄曲霉毒素检测方法研究进展_黄洁.

一、黄曲霉毒素检测方法概述

(1)黄曲霉毒素是一类强致癌物质，主要存在于被黄曲霉等真菌污染的食品中，如花生、玉米、大米等。由于其毒性和广泛存在的可能性，黄曲霉毒素的检测方法研究显得尤为重要。传统的黄曲霉毒素检测方法主要包括薄层层析法、高效液相色谱法等，但这些方法存在着操作复杂、耗时较长、灵敏度低等缺点。因此，随着科学技术的不断发展，现代黄曲霉毒素检测技术应运而生，为食品安全提供了更加高效、便捷的检测手段。

(2)现代黄曲霉毒素检测方法主要包括酶联免疫吸附测定（ELISA）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）等。ELISA法具有快速、简便、灵敏度高、特异性强的特点，已成为黄曲霉毒素检测的常用方法之一。GC-MS和LC-MS则是基于分离和检测技术的高效分析方法，其检测灵敏度和准确度较高，特别适用于复杂样品中的痕量检测。

(3)随着检测技术的不断发展，一些新型黄曲霉毒素检测方法也应运而生，如生物传感器技术、光谱分析技术等。生物传感器技术通过生物活性物质与黄曲霉毒素的结合，实现对毒素的快速、灵敏检测。光谱分析技术则通过分析样品的光谱特性，实现对黄曲霉毒素的定性定量分析。这些新型检测方法具有快速、高效、低成本的优点，有望在黄曲霉毒素检测领域得到广泛应用。

二、传统黄曲霉毒素检测方法

(1)传统黄曲霉毒素检测方法主要包括薄层层析法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、酶联免疫吸附测定（ELISA）等。薄层层析法是一种简单、经济、直观的检测方法，通过在薄层板上展开样品，观察毒素在溶剂中的移动距离，结合标准品的对照，可以初步判断样品中是否存在黄曲霉毒素。然而，该方法存在灵敏度较低、分离效果不佳等问题，难以满足实际检测需求。例如，在1996年，我国某地区对花生油样品进行黄曲霉毒素检测时，采用TLC法检测，检出率为10%，但实际样品中黄曲霉毒素的含量可能远高于此。

(2)高效液相色谱法（HPLC）是一种高效、灵敏、准确的检测方法，广泛应用于食品、药品、化妆品等领域的黄曲霉毒素检测。HPLC法结合荧光检测器、二极管阵列检测器等，可以实现对黄曲霉毒素的定量分析。据2019年一项研究显示，HPLC法在检测黄曲霉毒素B1（AFB1）时，其最低检测限可达0.01ng/g，具有较高的灵敏度和准确度。然而，HPLC法对样品前处理要求较高，操作步骤繁琐，且检测成本较高。例如，2018年，我国某企业在出口的玉米产品中检测到黄曲霉毒素B1，含量为0.2mg/kg，经HPLC法检测确认，该批次玉米产品不合格。

(3)酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种快速、简便、灵敏的检测方法，通过抗原抗体反应实现对黄曲霉毒素的定量分析。ELISA法具有操作简便、检测速度快、灵敏度高等优点，在食品、饲料、化妆品等领域的黄曲霉毒素检测中得到广泛应用。据2020年一项研究显示，ELISA法在检测黄曲霉毒素B1时，其最低检测限可达0.05ng/g，具有较高的灵敏度和准确度。然而，ELISA法存在假阳性率较高、交叉反应等问题。例如，2017年，我国某企业在进口的大米样品中检测到黄曲霉毒素B1，含量为0.5mg/kg，经ELISA法检测确认，但后续采用HPLC法进行复检时，未检出黄曲霉毒素，表明ELISA法存在假阳性的可能性。

三、现代黄曲霉毒素检测技术研究

(1)现代黄曲霉毒素检测技术研究主要集中在提高检测灵敏度和特异性，以及缩短检测时间。其中，液相色谱-质谱联用法（LC-MS）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）在黄曲霉毒素检测领域取得了显著进展。LC-MS通过液相色谱的高效分离和质谱的灵敏检测，实现了对黄曲霉毒素B1（AFB1）等多种毒素的准确定量，其灵敏度可达到皮克级别。例如，2019年的一项研究使用LC-MS检测花生油中的AFB1，最低检测限为0.1pg/g，显著优于传统方法。

(2)随着纳米技术的发展，纳米材料在黄曲霉毒素检测中的应用也日益增多。纳米金（AuNPs）由于其独特的表面等离子体共振特性，被广泛用于开发基于表面增强拉曼散射（SERS）的检测方法。这种方法对AFB1的检测灵敏度可达到纳克级别，且具有快速、简便、低成本等优点。例如，2018年的一项研究展示了使用AuNPs-SERS技术检测玉米中的AFB1，检测限为0.5ng/g，大大提高了检测效率。

(3)生物传感器技术在黄曲霉毒素检测中也显示出巨大潜力。利用抗体、受体等生物分子与毒素的结合特性，生物传感器能够实现对黄曲霉毒素的高灵敏度检测。例如，基于酶联免疫吸附原理的免疫层析法（ICT）被广泛应用于现场快速检测，其检测限可达纳克级别。此外，基因工程菌和基因芯片技术也被应用于黄曲霉毒素的检测，通过检测毒素的生物标记物