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血涂片的染色
染色方法瑞-吉复合染色法(Wright-Giemsastain)04吉姆萨染色法(Giemsastain)02瑞特染色法(Wrightstain)03罗氏染色法(Romanowskystain)01
1、瑞特染色瑞特染液:由酸性染料伊红(eosin)和碱性染料美蓝(methyleneblue)组成复合染料(M+E-)溶于甲醇而成。磷酸盐缓冲液(PBS):其pH保持在6.4~6.8之间,使染色环境在相对恒定的pH内,使细胞着色稳定。染色方法
细胞成分着色原理着色情况血红蛋白及嗜酸性颗粒等碱性物质与伊红结合粉红色淋巴细胞胞质及嗜碱性颗粒等酸性物质与亚甲蓝结合蓝紫色中性颗粒中性,与伊红、亚甲蓝均可结合染淡紫红色细胞核PH6.4-6.8,DNA、RNA带正电荷,组蛋白为强碱性物质,两者和伊红结合;细胞核还包含有少量弱酸性物质,可与亚甲蓝结合紫红色细胞的着色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。
正常瑞氏染色后血膜外观呈淡紫红色
质量保证染液成熟的过程中主要是亚甲蓝转变为天青B(azureB)。天青B愈多,染色效果愈好。吸光度比值RA=A650/A525。新配制染液的RA接近2,RA降至1.3±0.1即可使用。瑞特染液质量pH染色其他。
质量保证血涂片染色不佳原因对策染色偏红染液质量不佳(被氧化),冲洗用水的PH太低,冲洗时间太长更符合质量要求的染液,改用中性蒸馏水冲洗,规范操作染色偏蓝新玻片未用酸处理,新配制染液,染色时间太长,冲洗时间太短更符合质量要求的染液、玻片,规范操作染色偏浅染色时间太短,冲洗时间太长规范操作;如需该片,可以复染染料沉积染液未过滤,冲洗方法不当更换符合质量要求的染液,规范操作;如需该片,可用甲醇冲洗,再立即用清水冲洗,干后复染细胞核不着色染色时间太短,冲洗用水的PH太低延长染色时间,更换冲洗用水蓝色背景患者使用肝素或血液标本经肝素抗凝血液标本采用EDTA抗凝
方法学评价方法评价瑞特染色法最常用,对细胞质内的颗粒染色效果好,但对细胞核的染色较差吉姆萨染色法对细胞核和寄生虫着色好,但对细胞质、颗粒着色较差瑞-吉染色法对细胞质、细胞核着色均较好,对比鲜明
1、怎样的血涂片是合格的,如何保证?2、瑞特染色原理,染色效果如何保证?
开心上学
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