植物的细胞工程.ppt

核移植技术1.克隆羊培育过程黑面绵羊去核卵细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利第30页,共43页，星期六，2024年，5月体细胞核移植技术的应用前景畜牧业、医药卫生以及其他领域有着广泛应用前景1加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育2保护濒危物种，增加动物的存活数量3可作为生物反应器，生产医用蛋白克隆动物细胞、组织、器官可作为移植的供体了解胚胎发育及衰老过程、做疾病模型等第31页,共43页，星期六，2024年，5月体细胞核移植技术存在的问题胚胎移植－动物幼体产出概率＜10％克隆动物存在着健康问题克隆动物的食品安全性问题存在争议第32页,共43页，星期六，2024年，5月2.2.2第33页,共43页，星期六，2024年，5月一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合受精作用第34页,共43页，星期六，2024年，5月1、动物细胞融合（细胞杂交）－2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒用做诱导剂的病毒为什么必须事先灭活？第35页,共43页，星期六，2024年，5月植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒用途获得杂种植株制备单克隆抗体第36页,共43页，星期六，2024年，5月单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点：特异性强、灵敏度高第37页,共43页，星期六，2024年，5月如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞第38页,共43页，星期六，2024年，5月2.制备过程：诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法第39页,共43页，星期六，2024年，5月单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体第40页,共43页，星期六，2024年，5月单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。应用主要有：1、临床诊断2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤第41页,共43页，星期六，2024年，5月第42页,共43页，星期六，2024年，5月第43页,共43页，星期六，2024年，5月细胞工程应用的原理和方法研究的水平研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品概念分类植物细胞工程动物细胞工程第2页,共43页，星期六，2024年，5月植物细胞工程的理论基础是：植物细胞的全能性植物细胞工程的基本技术是植物组织培养植物体细胞杂交概念：细胞的全能性是指生物体的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质。全能性高低：①受精卵＞生殖细胞＞体细胞②植物细胞＞动物细胞2.1.1植物细胞工程常用的技术第3页,共43页，星期六，2024年，5月植物组织培养1、概念植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。2、植物组织培养的条件1）离体细胞、组织或器官2）适宜的外界环境条件，例如无菌、适宜的温度、湿度、光照等3）培养基（一定的营养物质，激素）第4页,共43页，星期六，2024年，5月植物组织培养的培养基无机营养成分：无机盐离子有机营养成分：①含N物质：包括维生素和氨基酸②碳源：2%—5%的蔗糖溶液，调节渗透压③琼脂：起支持