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第29页,共33页,星期六,2024年,5月2.负筛选法先控制培养基营养成分,使正常型细胞生长,而突变的细胞处于抑制不分裂状态,然后用一种能毒害细胞生长而对不分裂细胞无害的药物淘汰正常细胞。亚砷酸盐、某些核苷酸类似物营养缺陷性突变体3.“绿岛”法在整体的植株水平上,用某种化学物质作用于植株叶片,使细胞发生突变,叶片局部呈现绿色斑点,切下这部分细胞进行组织培养,通过培养细胞的再分化,使抗性细胞分化成完整植株。第30页,共33页,星期六,2024年,5月(二)一般筛选程序1.确定选择剂的浓度使90%以上培养物致死2.致死浓度筛选3.逐步筛选第31页,共33页,星期六,2024年,5月三、细胞突变体的筛选与利用(一)富含氨基酸和氨基酸类似物细胞突变体大豆缺失甲硫氨酸、玉米缺失赖氨酸和色氨酸、小麦缺失赖氨酸和苏氨酸、水稻缺失赖氨酸。通过采用氨基酸和氨基酸类似物选择抗性细胞突变体,达到改良人类食物营养品质需要的目的。高浓度的氨基酸或氨基酸类似物可以通过反馈性抑制与氨基酸生物合成的关键酶作用,而抑制植物细胞的正常生长。高赖氨酸玉米、高甲硫氨酸沙打旺、芦笋等。第32页,共33页,星期六,2024年,5月(二)抗病细胞突变体在离体条件下直接以毒素为选择压力筛选抗病细胞突变体,由这些突变细胞进一步再生出抗病植株。马铃薯晚疫病烟草野火病第33页,共33页,星期六,2024年,5月植物体细胞无性系变异第2页,共33页,星期六,2024年,5月第一节:体细胞无性系变异的来源与特征一、体细胞无性变异的概念与应用体细胞无性系:是指一切由植物的体细胞再生的植株。经过组织培养循环出现的再生植株的变异称为体细胞无性变异(stmaclonalvariation).体细胞无性变异的优点:诱变群体大,筛选方便;不受季节限制效率高;试验重复性好,诱变条件可控;诱变频率高变化幅度大;出现新的变异;在单细胞上进行避免出现嵌合体;可以拓宽种质资源、加快育种进程。缺点:畸变率高、依赖于基因型、变异并不总是稳定和遗传。第3页,共33页,星期六,2024年,5月海雀稗体细胞耐寒突变体筛选拓宽遗传资源,进行遗传改良在山东省潍坊地区,海雀稗原始品种受冻害致死,耐寒突变体材料能安全越冬(绿化)。第4页,共33页,星期六,2024年,5月遗传学研究、发育生物学研究、生化代谢途径研究。第5页,共33页,星期六,2024年,5月二、体细胞无性系变异的来源及影响变异的主要因素外植体来源:离体培养诱导:嵌合体存在于分化的细胞中嵌合体。
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3第6页,共33页,星期六,2024年,5月影响变异的主要因素:1.外植体的种类和基因型、染色体水平、生理状态、不同培养器官2.培养基的成分3.继代培养时间第7页,共33页,星期六,2024年,5月三、体细胞无性系变异的特征1.普遍性和多样性2.可遗传性不同植物都具有体细胞无性变异变异涉及到农艺性状、生化特征、抗病性和抗逆性、细胞遗传学和分子生物学方面的变异。可以通过有性生殖传递给后代。外遗传(epigenetic):性状的变异不是有DNA序列改变引起的植物表型变异,而是特定培养条件使某些基因表达调控发生变化所致,变异具有方向性,但不能通过有性生殖进行传递。第8页,共33页,星期六,2024年,5月体细胞变异的植物第9页,共33页,星期六,2024年,5月第10页,共33页,星期六,2024年,5月第11页,共33页,星期六,2024年,5月第12页,共33页,星期六,2024年,5月第二节:植物体细胞无性系变异机理在培养植物细胞和再生植株中发现各种不同变异存在,其中有些是可以遗传的变异,被称为体细胞无性系变异。细胞水平的变异:分子水平的变异第13页,共33页,星期六,2024年,5月一、细胞无性系细胞水平的变异(一)染色体数目变化整倍体变异:姊妹染色体分离与细胞分裂不同步。非整倍体变异:姊妹染色体进入相同的细胞。1.有丝分裂失败或进行无丝分裂2.核内有丝分裂,染色体复制而细胞并不分裂3.核内DNA复制而染色体并不复制,导致二分染色体和多线染色体的形成,二者恢复为正常染色体则也可能形成多倍体细胞。4.有丝分裂时出现多极纺锤体,分裂完成后产生3个以上细胞。第14页,共33页,星期六,2024年,5月细胞有丝分裂过程PlantCellAnimalCell第15页,共33页,星期六,2024年,5月多倍体细胞的产生第
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