交叉配血唾液定型.ppt

实验二交叉配血、唾液定型1实验目的掌握交叉配血的原理、方法和临床意义熟悉唾液定型的原理、方法和临床意义交叉配血原理交叉配血试验是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分试验包括主侧和次侧配血：主侧是受血者血清与供血者红细胞的反应次侧是受血者红细胞和供血者血清的反应只有两侧均不凝集或溶血才能输血盐水介质法酶法抗人球蛋白法凝聚胺介质法凝胶法方法盐水介质法天然IgM类血型抗体可与对应的红细胞在室温盐水介质中出现凝集反应，通过离心观察主次侧有无凝集现象。单击此处可添加副标题分离患者血清，1000r/min5min，标记为PS配制2%患者红细胞生理盐水悬液（需洗涤），标记为PC分离献血员血清，标记为DS配制2%献血员红细胞生理盐水悬液（需洗涤），标记为DC交叉配血：取试管两支，标记为主、次主侧配血管分别加PS2滴，DC1滴次侧配血管分别加DS2滴，PC1滴，混匀，1000r/min30sec观察结果：先观察试管上层有无溶血，再斜持试管轻轻摇动，观察管底有无凝集实验步骤注意事项1.用于交叉配血的病人(受血者)血液标本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管中的血液。2.用试管法作交叉配血试验，不能用玻片法。3.用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防纤维凝块的形成4.为确保输血安全，应输同型血。5.主次侧均无凝集反应表示配血相合，血液可以输注；任何一侧凝集或两侧均凝集为配血不合，禁忌输血6.配血试管中发生溶血现象时表明有抗原抗体反应并激活补体引起红细胞溶血，必须引起高度重视。7.加样时注意红细胞与血清的比例要适当（一般1：2为宜），比例失当时可能导致假阴性反应；反应温度也不能过低，以免非特异性冷抗体引起的冷凝集反应造成假阳性结果8.本法只能检测出IgM类完全抗体，不能检出IgG类免疫性的不完全抗体，对于有输血史（尤其是有输血反应史）、妊娠、免疫性疾病史和器官移植史的病人就不宜单独使用临床意义进一步验证受血者与供血者血型鉴定是否正确，发现ABO血型的不规则抗体以及ABO血型以外的配血不和，以避免血型鉴定错误而导致的输血后严重溶血反应。若受血者一次输血超过1600～2000ml时，除了做受血者与供血者之间的交叉配血外，还应作供血者之间的交叉配血，以防止供血者相互间血型不合及不完全抗体的存在，保证输血安全。唾液定型原理单击此处添加小标题ABH抗原不但存在于红细胞膜表面，还可存在于血清、唾液、胃液、精液、尿液、羊水和腹水等体液中，这些可溶性的抗原物质又被称为“血型物质”。凡体液中可检出这种血型物质者为分泌型；无血型物质者称为非分泌型。单击此处添加小标题唾液+定量抗体→+RBC+无血型物质有血型物质单击此处添加小标题混匀，室温5min单击此处添加小标题无游离抗体实验步骤1.唾液收集：5-10ml（可煮沸10min灭活唾液酶，离心取上清）2.洗涤ABO型RBC，分别配成2%红细胞生理盐水悬液3.将抗A、抗B、抗H血清用生理盐水分别1：16稀释反应物抗A管抗B管抗H管受检者唾液0.10.10.1抗A血清0.1--抗B血清-0.1-抗H血清--0.1混匀，室温5min2%A型RBC0.1--2%B型RBC-0.1-2%O型RBC--0.1