微生物的营养与培养基.ppt

☆磷酸缓冲液：pH值从6.0~7.6之间K2HPO4+HClKH2PO4+KClKH2PO4+KOHK2HPO4+H2O☆加入CaCO3：CO32–HCO3–H2CO3CO2+H2O+H+–H–+H+–H–☆培养基中所含氨基酸、肽、蛋白质等物质也可起到一定的缓冲作用。磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2MNaOH加水稀释至29毫升pH(20℃)XmLYmLpH(20℃)XmLYmL5.86.06.26.46.66.85555550.3720.5700.8601.2601.7802.3657.07.27.47.67.88.05555552.9633.5003.9504.2804.5204.680渗透压：由溶液中所含分子或离子的质点数决定的，由2种不同浓度的溶液产生的。溶液的质点数越多，产生的渗透压就越大。能在高盐环境（2.8~6.2g/LNaCl）生长的微生物常被称为嗜盐微生物（Halophiles）。而有的细菌如金黄色酿脓葡萄球则能在3mol/LNaCl的高渗溶液中生长。高渗溶液 细胞发生质壁分离等渗溶液 适宜微生物生长(大部分微生物)低渗溶液 细胞吸水膨胀，直至破裂3.物理化学条件适宜水活度在人为或天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量.一般用：在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比表示，即：aw=Pw/PowPw代表溶液蒸汽压力,P0w代表纯水蒸汽压力。纯水aw为1.00。溶液中溶质越多,aw越小。微生物一般在aw为0.60～0.99的条件下生长aw过低时,微生物生长的迟缓期延长,比生长速率和总生长量减少微生物不同，其生长的最适aw不同。aw：水分活度（wateractivity）各种微生物生长的水分活度：0.6~0.99之间aw=PP0细菌酵母菌霉菌微生物生长的最低aw一般：0.90~0.98嗜盐菌：0.75（约5.5mol/LNaCl）一般：0.87~0.91高渗酵母：0.61~0.65（饱和蔗糖液）Saccharomycesrouxii(鲁氏酵母)：0.60一般：0.80~0.87耐旱菌：0.65~0.75Xeromycesbisporus（双孢旱霉）：0.60氧化还原电势(redoxpotential)以Eh表示，是度量系统中还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的指标，其单位是V（伏）或mV（毫伏）各种微生物对培养基氧化还原电势要求不同：好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在0.1V以上的环境中均能生长)厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵Eh指以氢电极为标准时某氧化还原系统的电极电位值。标准氢电极是一个半电池，它由pH为零的HCl溶液、涂满铂黑的铂箔电极和压力为1个大气压的氢所组成的。在这种条件下，此标准氢电极的电极电位等于零。在溶液中的某氧化还原偶，当其氧化型和还原型的浓度相等时，所产生的氧化还原势可用E0表示。任何氧化还原系统所产生的氧化还原势明显地受pH的影响。在生物体系中，常用E′表示pH为7时某氧化还原偶的氧化还原势。氢电极E′的上限是+0.82V，它出现在高氧且没有氧消耗的环境中，下限为-0.42V，出现在富含氢的环境中。除测定电极电位外，培养基中的Eh值还可使用氧化还原指示剂如刃天青(resazurin)等来测定。刃天青在培养基中的加入量一般为1mg/L(1ppm)。它在无氧条件下呈无色状态，这时的Eh值相当于－40mV左右；在有氧条件下，其颜色与溶液的pH有关(中性时呈紫色，碱性时呈蓝色，酸性时呈红色；在微量氧时，它呈粉红色。刃天青的变色反应机理是：微生物的培养基常常是一个具有多对氧化还原偶的复杂电化学系统，这时所能测出的Eh值仅代表了它们的综合结果。在各对氧化还原偶中，对微生物生长繁殖影响最大的是分子氧与分子氢的浓度，这对严格厌氧菌的影响尤为重大。配制培养基、灭菌、接种和培养等一切操作过程中必须采用严格厌氧技术以去除氧气外，还要在培养基中加入一定量的还原剂，例如可用巯基乙酸(0.0