实验室消毒灭菌作业规范 .docx

第1页共10页

实验室消毒灭菌作业规范

一概念

(一)消毒

是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理。根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源性消毒；根据消毒的时间可分为随时消毒和终末消毒。

(二)灭菌

是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物(包括芽胞),使之达到无菌程度。经过灭菌的物品称“无菌物品”。

消毒与灭菌是两个不同的要领。灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。消毒通常用于实验室检测环境、人员手部等，灭菌通常用于检测用具、检测试剂等。

二消毒、灭菌的原则

(一)明确消毒的主要对象

应具体分析引起污染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。

第2页共10页

(二)采取适当的消毒方法

根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。

(三)控制影响消毒效果的因素

许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。

1.微生物的种类

不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同，因此，进行消毒时必须区别对待。

(1)细菌繁殖体。易被消毒剂消灭，一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂

较敏感，革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。繁殖体对热敏感，消毒方法以热力消毒为主。

(2)细菌芽胞。芽胞对消毒因子耐力最强，杀灭细菌芽胞最可靠的

方法是热力灭菌，电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。在化学消毒剂中，戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞，但可靠性不如热力灭菌法。

(3)病毒。对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异，亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。

(4)真菌。对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强，但

第3页共10页

不耐热(60℃1小时杀灭)。

2.微生物的数量

污染的微生物数量越多需要消毒的时间就越长，剂量越大。

3.有机物的存在

(1)有机物在微生物的表面形成保护层妨碍消毒剂与微生物的接触或延迟消毒剂的作用，以致微生物逐渐产生对药物的适应性。

(2)有机物和消毒剂作用，形成溶解度比原来更低或杀菌作用比原来更弱的化合物。

(3)一部分消毒剂与有机物发生了作用，则对微生物的作用浓度降低。

(4)有机物可中和一部分消毒剂。消毒剂中重金属类、表面活化剂等受有机物影响较大，对戊二醛影响较小。

4.温度

随着温度的升高，杀菌作用增强，但温度的变化对各种消毒剂影响不同。如甲醛、戊二醛、环氧乙烷的湿度升高1倍时，杀菌效果可增加10倍。而酚类和酒精受温度影响小。

5.pH值

第4页共10页

从两方面影响杀菌作用。一是对消毒剂的作用：改变其溶解度和分子结构。二是pH过高或过低对微生物的生长均有影响。在酸性条件下，细菌表面负电荷减少，阴离子型消毒剂杀菌效果好。在碱性条件下，细菌表面负电荷增多，有利于阳离子型消毒剂发挥作用。

6.处理剂量与监测

保证消毒、灭菌处理的剂量，加强效果监测，防止再污染。

三消毒、灭菌的方法

(一)物理消毒灭菌法

利用物理因子杀灭微生物的方法。包括热力消毒灭菌、辐射消毒、空气净化、超声波消毒和微波消毒等。

1.热力消毒灭菌

高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固(结构改变导致功能丧失),新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。

2.干热消毒灭菌

干热是指相对湿度在20%以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以

第5页共10页

杀死，芽胞需160-170℃经2小时方可杀死。

(1)燃烧法

是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。

烧灼法：一些耐高温的器械(金属、搪瓷类),在急用或无条件用其

他方法消毒时可采用此法。将器械放在火焰上烧灼1-2分钟。若为搪瓷容器，可倒少量95%乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点

火燃烧至熄灭约1-2分钟。采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后(即启盖后，闭盖前)都应将试管(瓶)口和盖子置于火焰上烧灼，

来回旋转2-3次。

燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。

焚烧：某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。

(2)干烤法

电热培养箱：利用培养箱的热空气消毒灭菌。培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。一般

第6页共10页

繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160-170℃经2小时方可杀死。热空气消毒灭菌法适用于玻璃