《贵州茶叶中风味挥发性物质的测定_气相色谱质谱法》.docx

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T/GZTPA0009-2021

贵州茶叶中风味挥发性物质的测定气相色谱质谱法

1范围

本文件规定了贵州茶叶中主要风味挥发物质组成及含量的方法。本文件适用于贵州茶叶中主要风味挥发物质含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法

NY/T2102茶叶抽样技术规范

3术语与定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

在一定温度条件下，顶空瓶内茶叶样品的挥发性组分向上空间挥发，产生蒸气压，在气-固二相达到热力学动态平衡时，其物质组成和浓度在两相基本保持一致，再采用固相微萃取纤维头对气相部分物质进行吸附萃取，通过进样口解析后进行色谱分离，然后再通过质谱仪进行物质定性分析，并采用内标相对含量法对风味挥发物质进行相对含量测定。

5试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

5.1氯化钠(NaCl);

5.2乙酸苯乙酯(C?oH??O?):色谱纯，;

5.3正己烷(C?H?4):色谱纯；

6仪器设备

6.1气相色谱-质谱联用仪：气相色谱-质谱，EI源。

6.2固相微萃取仪；

6.3萃取纤维头：50/30μm,PDMS/DVB/CAR;

6.4顶空瓶：20mL;

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6.5分析天平：感量0.1mg。

7样品制备与保存

7.1制样

茶叶样品按照NY/T2102进行采样和分样后，取样品约200g,经粉碎机粉碎，过60目筛，制成茶叶粉末，一式两份。

7.2保存

试样密封避光保存于4℃冰箱，待用。

8分析步骤

8.1样品制备处理

称取茶叶样品0.2g(精确至0.0001g)至20mL顶空样品瓶中，加入0.2g(精确至0.001g)氯化钠，用玻璃棒混匀，同时加入50ng的内标物乙酸苯乙酯，用顶空瓶盖将其密封。然后将顶空瓶放入到固相微萃取仪加热装置中，在60℃条件下平衡20min,利用固相微萃取纤维头吸附20min,在250℃进样口解析进行气相色谱质谱分析。

8.2分析条件

8.2.1固相微萃取条件

a)纤维头PDMS/DVB/CAR;

b)样品孵化温度：60℃;

c)样品孵化时间：20min;

d)萃取吸附时间：20min;

e)解析温度：250℃;

f)解析时间：3min。

8.2.2色谱条件

a)色谱柱1:HP-FFAP(50m×200μm,0.3μm)或等效柱；色谱柱2:DB-WAX(30m×250μm,0.25μm)毛细管气相色谱柱或等效柱；

b)载气条件：流速1.0mL/min,不分流进样；

c)进样口温度：250℃;

d)色谱柱1柱温箱升温程序：炉温初始为40℃,保持2min,以2℃/min升温至220℃,保4min;样品运行时间：92min),溶剂延迟时间：4min;

e)色谱柱2柱温箱升温程序等同于色谱柱1柱温箱升温程序。

f)传输线温度：260℃。

8.2.3质谱条件

a)扫描方式：质量全扫描模式，扫描质量数范围：40m/z~450m/z;

b)电离方式：电子轰击电离源(EI源，电子能量70eV);

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c)离子源温度：230℃;

d)四级杆温度：150℃;

e)电离电压：70eV。

8.3定性与定量

8.3.1保留指数定性

在相同的条件下进行样品测定，被测试样中目标化合物色谱峰的保留指数与附录中提供化合物或查阅资料的保留指数相比较，相对误差应在±2.0%之内。

8.3.2物质鉴定定性

实验质谱数据采用NIST标准谱库自动检索相识度匹配与人工解析相结合，查阅有关质谱资料，对质荷比、相对峰度、分子离子峰等进行分析，质谱信息的正向和反向匹配相似度≥800的色谱峰可定性。

8.3.3定量分析

采用乙酸苯乙酯的内标相对含量法或面积归一法半定量。

8.4样品测定

将试样注入气相色谱-质谱联用仪，经色谱分离，质谱检测采集质谱数据，设定自动识别信噪比大于100的色谱峰，使用NIST数据库进行相识度匹配；所检索的化合物的正向和反向匹配相似度均800以上