石蜡样本制作微阵列组织芯片通用技术规范 .docx

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ICSXX.XXX.XX

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团体标准

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石蜡样本制作微阵列组织芯片通用

技术规范

Generaltechnicalspecificationfortissuemicroarrayproducedby

Paraffin-embeddedsamples

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布

中国研究型医院学会发布

XXXX-XX-XX实施

XXXX-XX-XX实施

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石蜡样本制作微阵列组织芯片通用技术规范

范围

本文件规定了石蜡样本制作微阵列组织芯片的总则、制作原理、试验方法和性能要求等内容。

本文件适用于科研用石蜡样本制作微阵列组织芯片的通用技术规范。

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T37864-2019生物样本库质量和能力通用要求

GB/T27990-2011生物芯片基本术语

术语和定义

以下术语和定义适用于本文件。

组织芯片技术tissuechiptechnology

是将数十个至上千个不同个体的组织样本，按照预先设计的顺序排列在一张玻片上进行分析研究的方法。

微阵列microarray

以阵列方式设定在平面基质载体上能够并行处理生物样品中多个信息的微处理单元的集合体。

微阵列组织芯片tissuemicroarray

又称为组织芯片，在基片表面以微阵列形式将微小组织切片样本固定后所构成的微型器件。

石蜡包埋paraffin-embedding

将组织样品置于石蜡中，产生固化的周围基质，制作成石蜡组织样本，用于切割出薄层显微切片的过程。

HE切片HEsection

将石蜡包埋的组织制成蜡块后，用切片机制成病理组织切片，再经脱蜡、苏木素及伊红染色，脱水封片后制作而成的常规组织染色切片。

阵列规整度regularity

微阵列上各点所在行列的对齐程度，规整度通常用样品点间中心距离的差异来衡量。

相关数据associateddata

生物样本的附属信息，包括但不限于研究数据、表型数据、临床数据、流行病学数据和生物样本处理过程得到的数据等。

贮存storage

在适宜的条件下长时间中断样品、分析物或其衍生物（如染色切片或组织块）的分析前工作流程，以保持其特性。

总则

本标准适用于科研用石蜡样本制作组织微阵列的通用技术规范。开展此项技术，应具备专用区域，技术人员需获得相关专业的人员培训证书，并严格遵循实验室操作规程，相关操作需符合《实验室生物安全通用要求》。

基本原理

组织芯片是利用微点阵技术，将数十、数百乃至上千个特定大小的组织片有序排列在固相载体上，用于研究生物分子在机体内的表达。

试验方法

材料

6.1.1主要设备：生物安全柜、光学显微镜、病理切片机、组织芯片仪等。

6.1.2试剂耗材：蜡块、载玻片、盖玻片、苏木伊红染色液等。

方法

6.2.1组织芯片蜡块的制作

组织筛选与定位依据科研目的，收集病例及相关石蜡样本，制作HE切片，显微镜下复核诊断，选定目标区域后，添加标记。

受体蜡块的准备若自行制作，受体蜡块的软硬度应与供体蜡块相似，可利用组织芯片仪在受体蜡块上打孔。另外，亦可以使用商品化的受体蜡块用于后续制作。

组织芯的采集与转移将HE切片的标记区域一一对应地标记在供体蜡块的相应位置。然后采集它们的组织芯，整齐有序地转移至相应的受体蜡块之中。在此过程中，应选择性能稳定的手动或是半（全）自动组织芯片仪，用于组织芯的采集和转移，避免使用自制的简易设备用于组织芯片蜡块的制作。

受体蜡块与组织芯融合经烤箱加热后进一步微调受体蜡块中组织芯的高度，并使之相互融合成一体，制成组织芯片蜡块。

6.2.2组织芯片切片的制作

6.2.2.1组织芯片蜡块放4℃冰箱预冷。

6.2.2.2用切片机对组织芯片蜡块进行连续切片，制成厚度约为5μm的病理组织切片，再将其转移至载玻片上，即可得到组织芯片切片。

6.2.2.3组织芯片切片应进行烘干，一般为55℃环境下，时长不低于1小时。待晾至常温后，可以临时将其放置切片储存柜内备用。

信息存储

被检测样本的编号应具有唯一性。待样本依据科研方案排列整理后，应及时做好记录工作，确保样本