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第52讲动物细胞工程一、动物细胞培养二、动物细胞融合技术与单克隆抗体三、动物体细胞核移植技术和克隆动物
课标要求核心素养1.植物细胞工程包括组织培养和体细胞杂交等技术。2.动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术。1.科学思维:说明植物组织培养和植物体细胞杂交的原理;说明动物细胞培养的条件和动物细胞培养过程中细胞生长的特点;结合具体实例,以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。2.科学探究:查阅资料,尝试探究植物生长素和细胞分裂素使用比例对植物组织培养的影响。3.社会责任:列举植物组织培养技术在生产实践中的应用,说明植物细胞工程对生产的影响;说明干细胞在医学、药物安全性与有效性检测等领域的应用及存在的问题。
一、动物细胞培养1.动物细胞培养③培养对象:胚胎或幼龄动物的细胞幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。①概念:②原理:④地位:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。细胞分裂(增殖)⑤目的:获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体(1)动物细胞培养概述动物细胞培养(基础)动物细胞核移植动物细胞融合生产单克隆抗体动物细胞工程
一、动物细胞培养哺乳动物细胞培养的温度多以_________为宜;(2)培养条件营养条件:除糖类、氨基酸、无机盐和维生素等细胞所需的营养物质外,通常还需加入血清等一些天然成分无菌、无毒的环境:①对______和____________进行_____处理;②在________下进行操作;③还需要______________。培养液所有培养用具灭菌无菌环境定期更换培养液以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害多数动物细胞生存的适宜pH为________①适宜的温度:36.5±0.5℃7.2-7.4维持细胞正常的形态和功能②适宜的pH:③适宜的渗透压:温度PH和渗透压:提供细胞代谢所必需的O2维持培养液的pH(95%)空气:(5%)CO2:气体环境:蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等促进细胞代谢和生长的物质
一、动物细胞培养(3)培养过程①制备细胞悬液②动物细胞培养分散细胞制备悬液方法机械法酶解法用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5,当pH大于6时,胃蛋白酶就失去活性,多数动物细胞培养的适宜pH为7.2-7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性,所以用胃蛋白酶不行。目的将动物组织分散成单个细胞用培养液将细胞制成细胞悬液[易错提醒]动物细胞培养一般用液体培养基,植物组织培养一般用固体培养基。为何不用胃蛋白酶?
一、动物细胞培养(3)培养过程①制备细胞悬液②动物细胞培养培养对象能悬浮在培养液中生长增值的细胞需要贴壁于某些基质表面才能生长的细胞贴壁细胞特点细胞贴壁贴壁细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上生长增殖接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。培养阶段原代培养传代培养原代培养过程中贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理,然后分瓶细胞培养分瓶之前的细胞培养影响因素细胞密度过大有害代谢物积累培养液中营养物质缺乏
取动物组织制成细胞悬液放入CO2培养箱中培养转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养一、动物细胞培养(3)培养过程传代培养[易错提醒]区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶;分瓶前,第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养;第二次用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,分瓶后的细胞培养为传代培养。
一、动物细胞培养2.动物细胞培养与植物组织培养植物组织培养动物细胞培养原理培养前处理取材培养基的物理性质培养基的成分特有成分植物细胞的全能性细胞增殖离体用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开离体植物器官、组织、细胞动物胚胎或幼龄动物的组织、器官固体(MS培养基)液体(又称培养液)有机营养成分无机营养成分植物激素糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质及一些天然成分如血清植物激素血清
一、动物细胞培养植物组织培养动物细胞培养特殊环境条件结果是否体现细胞的全能性过程相同点再分化需光气体环境一般获得新的植株获得大量细胞是否①培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;②均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件。外植体脱分化愈伤组织再分化根、芽幼苗完整植株移栽成活取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养分瓶进行传代培养2.动物细胞培养与植物组织培养
(3)分布:(4)分类:存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。包括胚胎干细胞和成体干细胞等。动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。在一定条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。(2)特点:体积较小,细胞核大,核仁明显。(1)概念:受精
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