DB22T 2051-2014 饲料中肉毒梭菌测定 PCR 方法　　.pdfVIP

ICS07.100.30

B20

备案号：41839-2014DB22

吉林省地方标准

DB22/T2051—2014

饲料中肉毒梭菌测定PCR方法

DeterminationofClostridiumbotulinuminfeedstuffsPCRmethod

2014-02-28发布2014-04-30实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T2051—2014

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。

本标准主要起草单位：吉林省产品质量监督检验院、国家农业深加工产品质量监督检验中心、中华

人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国顺德出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：史艳宇、刘金华、邵秋荣、刘斌、周亮、刘晓晖、王潇、任明月。

T

DB22/T2051—2014

饲料中肉毒梭菌测定PCR方法

1范围

本标准规定了饲料中肉毒梭菌的PCR检验方法。

本标准适用于饲料中A、B、E、F型肉毒梭菌的快速筛选检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

肉毒梭菌clostridiumbotulinum

肉毒梭菌为梭菌科梭菌属革兰氏阳性芽孢杆菌，厌氧，在适宜的培养基及特定的环境条件下产生一

类具有很强毒性的神经麻痹毒素，即肉毒毒素。

4原理

样品增菌后，培养物经DNA提取制备PCR模板，进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物是否

有特征条带，从而对饲料中是否污染肉毒梭菌进行快速检验。

5试剂

除特别说明以外，所有试剂均为分析纯，水为按照GB/T6682规定的一级水。所有试剂均用无DNA

酶污染的容器分装。

5.1引物：见表1。

1

DB22/T2051—2014

表1引物序列

扩增长度

目标菌类型引物序列

bp

上游引物：5-GTGATACAACCAGATGGTAGTTATAG-3”

A型983

下游引物：5-AAAAAACAAGTCCCAATTATTAACTTT-3”

上游引物：5-GAGATGTTTGTG