《病原生物与免疫学》第19章生物素-亲合素系统.pptx

第十九章

生物素-亲合素系统及其

在免疫检测技术中的应用;熟悉：生物素-亲和素系统特点及应用。

了解：其他。;生物素——亲合素系统

（biotin-avidinsystem,BAS）;维生素H（维生素B7）

动、植物组织中广泛

分布,卵黄和肝含量高

MW244.31kD.;生物素侧链的末

端羧基经化学修

饰后制成带各种

活性基团的衍生

物－活化生物素

(生物素化衍生物);活化生物素

易与抗原、

抗体偶联形

成生物素化

标记物;第二节

亲合素和链霉亲合素的特性;

结构四亚基糖蛋白四肽链蛋白无糖基

PI10.56

结合位色氨酸色氨酸

生物素44

活性13～1518;1.高特异性

2.高敏感性

3.稳定性强

4.适用性广、实用性强

成本低;第四节生物素-亲合素系统

在免疫检测技术中的应用;BAS在ELISA中的应用

生物素-亲合素系统在

均相酶免疫定;1.生物素-链霉亲合素-生物素化抗体（或抗原）包被法;2.链霉亲合素-生物素化抗体（或抗原）包被法;（一）生物素-亲合素-生物素模式

1.生物素-亲合素-生物素法（BAB法）

2.亲合素-生物素-过氧化酶复合物法（ABC法）;BAB法：

Ag+B·AbAg-Ab·BAAg-Ab·B-A

B·EAg-Ab·B-A-B·E

特点：以游离A分别连接B-Ab和B-E;原理*ELISA-BAB法：

桥连亲和素-标记生物素法;ABC法

⑴A+B·EA-B·EABC

⑵Ag+B·AbAg-Ab·BABCAg-Ab·B-ABC

特点:

将BAB法中的A先与B-E结合，制备成复合物ABC;BA法：

Ag+B·AbAg-Ab·BA·EAg-Ab·B-A-B·E

特点：

以A-E/SA-E代替BAB法中的A

省却了加B-E的步骤。;1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素()

A.1B.2C.3D.4E.5

2.生物素分子中与亲和素结合的主要部位是()

A.噻吩环B.咪唑酮环C.苯环

D.羰基E.-NH-

3.亲和素分子中结合生物素分子的基团是()

A.戊酸侧链B.末端羧基C.缬氨酸残基

D.色氨酸残基E.赖氨酸残基;4.在生物素分子中可连接生物大分子(Ag/Ab)的部位是()

A.戊酸侧链B.咪唑铜环C.噻吩环

D.侧链末端羧基E.苯环

5.1mg亲和素的活性单位是()

A.3-5UB.5-8UC.13-15U

D.15-18UE.20-30U

;6.1mg链霉亲和素的活性单位是()

A.5UB.8UC.15UD.18UE.20U

7.生物素-亲和素系统中ABC的含义是()

A.生物素-抗体B.生物素-亲和素抗体复合物

C.生物素-酶复合物D.亲和素-酶复合物

E.亲和素-生物素化酶复合物

8.不属于BAS特点的是（）

A.特异型好B.敏感性高C.稳定性好

D.两者结合易受酸碱条件的影响E.实用性强