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第七节薄层扫描法讲解.pptx

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;一、仪器工作原理

(一)薄层色谱扫描法的基本原理;吸收薄层扫描测定法

是用可见-紫外光的单色光对薄层板上色谱斑点进行扫描,根据扫描获得的吸光度随展开距离变化的图谱及积分数据进行定量的方法。根据测光的方式不同,吸收扫描测定法又分为透射法和反射法两种。;1.定义薄层扫描法是供试品经薄层分离后,用一束波长、强度一定的紫外线或可见光对薄层板进行扫描,通过测定薄层板上的斑点对光的吸收强度或斑点经激发后所产生的荧光强度,将扫描得到的图谱及积分数据进行定量的方法。;薄层荧光扫描法是通过仪器对供试品吸收可见-紫外光后发射的荧光强度扫描得到的吸收光谱及积分数据,求出供试品含量的方法。;当样品量很少时,斑点中组分的浓度与荧光强度呈线性关系,可按公式计算:F=2.3K/IoECL或F=KC

式F=2.3K/IoECL中:F为荧光强度;Io为入射光强度;C为浓度;E为吸收系数;K为常数(与荧光效率有关);L为薄层厚度。

式F=KC中:C为浓度;K为2.3K/IoEL之积。

在薄层荧光扫描法中,常用斑点荧光强度的积分值(色谱峰面积)代替公式中的F,斑点中组份的含量代替公式中的C进行计算。;(二)薄层扫描仪的构造;二、含量测定;选择;三、含量计算

(1)外标一点法:标准曲线通过原点。

计算公式:C=F1·A

(2)外标两点法(随行标准法):标准曲线不通过原点。

计算公式:C=F1·A+F2

由C1=F1·A1+F2C2=F1·A2+F2得;四、案例

(一)灵宝护心丹的含量测定;(二)六味地黄胶囊中酒萸肉的含量测定

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