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生化工程第二章培养基灭菌三营养受热分解规律符合微生物热死亡动力学规律和Arrhenius方程:-dC/dt=K’C可变形为:ln(Cs/Co)=-K’t或Cs=C0e-K’tK’=Ae-ΔE’/RTK’:营养成分受热分解速率常数(min-1,s-1)ΔE:营养成分受热分解反应的活化能(J/mol)生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌化学反应动力学:活化能大的反应,反应速度随温度的变化也大;反之,反应速度随温度的变化也小。注:微生物受热死亡的活化能ΔE比营养成分受热分解的活化能ΔE’大。ΔE大,说明反应速率随温度变化也大;当温度升高,微生物死亡速度比营养成分分解速度快。微生物活化能(J/mol)营养物活化能(J/mol)嗜热芽孢杆菌283460葡萄糖100488肉毒杆菌343300维生素B192114当温度升高,微生物死亡速度比营养成分分解速度快。故采取高温瞬时,有利于快速杀灭菌体,而且减少营养的破坏。生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌例题:1.若温度从120℃升至150℃,分别计算120℃和150℃下的VB1的分解速率常数KB和嗜热芽孢杆菌的比死亡速率常数Ks;并比较KB150/KB120;Ks150/Ks120,反映何种规律。已知ΔEB1=92114J/mol,AB1=9.30×1010(min-1);ΔEs=284460J/mol,As=1.34×1036(min-1)2.在120℃下灭菌7.6min,计算此时VC的损失率。(120℃下,若Kc=0.055min-1)生化工程第二章培养基灭菌问题:为何工业上采用高温瞬时的灭菌方式?生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌第三节???分批灭菌培养基和发酵罐同时灭菌,冷却至发酵温度再接种发酵。又称间歇灭菌或实罐灭菌(实消)。分批灭菌的特点:适用于:培养基易发泡或黏度大优点:操作简便,无需连消的设备,并减少了杂菌污染的机会缺点:升温降温时间长,设备利用率低生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌一灭菌效果(灭菌准数、灭菌值)当灭菌温度恒定下,培养基中微生物死亡遵循:lnN0/Ns=-kt当温度随时间变化时,K也变化:积分得ln(No/Ns)=A升温、维持和冷却过程的灭菌效果为:V总=ln(No/Ns)=V加+V保+V冷V加=ln(No/N1)=AV保=ln(N1/N2)=K(t2-t1)V冷=ln(N2/Ns)=A生化工程第二章培养基灭菌二分批灭菌讨论工业灭菌,灭菌周期约3~5h,各阶段的灭菌贡献大致为:V加/V总=0.2,V保/V总=0.75,V冷/V总=0.05?生化工程第二章培养基灭菌3.某厂培养基初始杂菌数为106个/ml,生产要求最终无菌度为10-3。当发酵容器由1m3放大至10m3时,总灭菌效果增加多少。生化工程第二章培养基灭菌4.发酵培养基60m3,初始杂菌数为105个/ml,生产要求最终无菌度为10-3。采用分批灭菌方式,120℃维持5min.已知升温和降温的灭菌效果不超过总灭菌度效果的25%。则所设计的T-t过程是否达到无菌要求。如何改进。生化工程第二章培养基灭菌生化工程第二章培养基灭菌第二章
培养基灭菌
MediumSterilization生化工程第二章培养基灭菌生化工程学的起点1.抗杂菌污染的纯种培养技术(pureculture):无菌空气、培养基灭菌(sterilization)、无污染接种、大型发酵罐的密封与抗污染设计制造。2.通气搅拌解决了液体深层培养时的供氧问题。建立关键技术:奠定生化工程学科基础。生化工程第二章培养基灭菌生物反应过程示意图生化工程第二章培养基灭菌目的:发酵过程要求纯培养灭菌(sterilization):培养基(medium)空气发酵罐及管道消毒(disinfection)生产环境灭菌与消毒的区别?
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