植物组织培养的基本知识及操作技术.pptVIP

吲哚乙酸：IAA（indoaceticacid）萘乙酸：NAA（naphthaleneaceticacid）吲哚丁酸：IBA（indolebutyriacid）2,4-二氯苯氧乙酸：2,4—D(2,4-dichlorophenoxybutyricacid)生长素种类：01IAA(吲哚乙酸)02NAA(萘乙酸)03IBA(吲哚丁酸)042,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸)05生长素作用强弱顺序：06强07弱无菌室（二）主要单元功能介绍：准备室：洗涤区：排水良好、地板耐湿灭菌区：地面、墙面防潮、耐高温；绝缘化学实验区：器皿洗涤、干燥、保存；药品称量、溶解；培养基配制；材料预处理；培养材料观察分析等。主要设备包括：工作台、药品柜、冰箱、烘箱、天平、蒸馏水器等。STEP3STEP2STEP1无菌操作室：要求：无菌；光照好；墙面尽可能光滑、易消毒；防止空气对流；具有消毒措施（甲醛熏蒸、紫外灯照射）设备：超净工作台；接种箱培养室：满足植物材料的生长要求：采光；保温；隔热；控温；控光；暗室设备：培养架；控温设备细胞学实验室：培养材料的分析、照相设备：显微镜、解剖镜、染色设备常用仪器设备仪器天平精度1/10药物天平：大量元素、蔗糖、琼脂精度1/10000分析天平：维生素、激素、微量元素及附加物精度1/1000扭力天平：灭菌锅普通医用灭菌锅大的高压灭菌锅培养基、水、各种器皿的消毒灭菌烘箱（干燥箱）80℃测定植物组织干重80-100℃烘干物品150-160℃干热灭菌冰箱试剂和母液的贮藏；细胞及其他材料的冷藏保存；植物材料的处理等。酸度计培养基及酶制剂的pH值调整超净工作台蒸馏水器/纯水器细胞培养设备培养架细胞学鉴定设备光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜光学显微镜必要器皿玻璃器皿培养器皿：培养皿、试管、三角瓶盛装器皿：烧杯、试剂瓶计量器皿：量筒、容量瓶、吸管其它：漏斗、玻棒、滴瓶培养皿三角瓶培养瓶金属器皿镊子类剪刀类分离器械镊子接种针解剖刀大量元素、微量元素、维生素、氨基酸凝固剂：琼脂、凝胶常备药品糖类：蔗糖、果糖、葡萄糖激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素外植体的选择和处理01培养基及制备02无菌技术03培养环境04第三节植物组织培养的一般技术分生组织带芽外植体胚雌雄配子体外植体的类型一、外植体的选择和处理取材植株预栽培取材植株的预处理培养材料的贮藏外植体的预处理外植体的消毒、灭菌外植体的切离和接种外植体的选择和处理培养基的组成二、培养基及制备植物体内至少含有几十种化学元素，其中大部分元素在植物体内起到一定的生理作用：a、组成各种化合物，参与机体的建造，成为结构物质；b、构成一些特殊的生理活性物质，参与活跃的新陈代谢；c、元素之间相互协调，以维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡等点化学方面的作用；d、发育方面，特定的元素影响植物的形态发生和组织、器官建成。其它添加物碳水化合物植物生长调节剂有机营养物无机营养物培养基组成无机营养元素(inorganicelement)大量元素：指浓度大于0.5mmol／L的元素。[N、P、K、Mg、S和Ca等]。微量元素：指小于0.5mmol／L的元素。[Fe，B，Mn，Cu，Mo，Co等]。有机化合物(organiccompound)碳水化合物最常用的碳源是蔗糖，葡萄糖和果糖也是较好的碳源。使用浓度在1%-7%，常用3%作用：碳源；维持培养基渗透压。（2）维生素(vitamin)在细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动。种类：VBl(盐酸硫胺素)、VB6(盐酸吡哆醇)、Vpp(烟酸)、Vc（抗坏血酸）、VH(生物素)、VB11(叶酸)、VB12（钴胺素)等。使用浓度：一般用量为0.1—1.0mg／L。作用：适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。又叫环己六醇，在糖类的相互转化中起重要作用。使用浓度：一般为lOOmg／L，肌醇作用：是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。种类：最常用的是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等。使用浓度：为1