植物组织培养第十一章植物种质资源的保存.pptVIP

第十一章植物种质资源的保存本章内容提要：一、概念及保存类型二、种质资源离体保存（一）、低温保存（二）、超低温保存（三）、生长抑制剂保存1是指利用天然或人工创造的适宜环境保存种质资源，使个体中所包含的遗传物质保持其遗传完整性和活力，并能通过繁殖将其遗传特性传递下去。植物种质资源保存:原生境保存、非原生境保存。其保存类型:2一、概念及保存类型2原生境保存的地方大多是植物保区；3另一种方法为农田种植保存。1将植物的遗传材料保存在它们的自然环境中。1、原生境保存珍宝岛国家级自然保护区美国、马里兰、农田将植物的遗传材料保存在不是它们的自然生境的地方。01非原生境保存方式有：植物园、种子库、种质圃、试管苗库、超低温库等。02保存方法有：种植保存、贮藏保存、离体保存和基因文库保存。032、非原生境保存华南植物园昆明野生生物种子库超低温库01离体保存方法：低温保存、超低温保存和生长抑制剂保存。02定义:就是将要保存的种质以离体的形式保存起来的方法。二、种质资源离体保存低温保存一种缓慢生长保存方法，是通过控制培养温度来限制培养物各种生长因子的作用，使培养物生长减少到最低限度。低温保存冰箱低温保存的基本特征：保存材料的定期继代培养，不断繁殖更新；基本措施是：控制保存材料所处的温度和光照。延缓保存材料生长速度的另一项措施是：改变培养基的成分。注意！种质库要定期检查，保持清洁，及时清除污染材料，并注意积累资料。超低温保存又称冷冻保存，一般以液N2为冷源，使保存温度维持在-196℃。低温冰冻过程中，如果生物细胞内水分结冰，细胞结构就遭到不可逆的破坏，导致细胞和组织死亡。01植物材料在超低温条件下，冰冻过程中避免了细胞内水分结冰，并且在解冻过程中防止细胞内水分次生结冰而达到植物材料保存目的。02植物细胞含水量大，冰冻保存难度大，投放液N2中易引起组织和细胞死亡，故须借助于冷冻防护剂，防止细胞冰冻或解冻时引起过度脱水而遭到破坏，保护细胞。031、保存原理超低温冰箱基本程序基本程序包括：预处理、冷冻处理、冷冻贮存、解冻和再培养。预处理为保证茎尖在液N2处理后具有稳定且高的存活率，需进行一定的预处理，或在冷冻防护剂存在下进行预培养，或直接进行低温（-3—10℃）预处理。快速冷冻法；2干燥冷冻法。4冷冻处理的方法有：1慢速冷冻法；3预冷冻法；5（2）冷冻处理指将植物材料从0℃或者其他预处理温度直接投入液氮中保存的方法，降温速度为1000℃/min。0102采用该法要求细胞体积小、细胞质浓厚、含水量低、液泡化程度低的材料。a、快速冷冻法将处于0℃或其他预处理温度的材料以1～2℃/min的降温速度从起始温度降到-100℃，稳定1h后，投入到液氮保存或以此降温速度连续降温至-196℃的方法。适宜保存的材料有：成熟的、含有大液泡和含水量高的细胞，对于保存在悬浮培养中的细胞特别有效。0102b、慢速冷冻法