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无菌:没有活的微生物存在的状态。无菌操作技术:用于防止微生物进入无菌范围造成污染的操作技术。无菌的环境无菌的器具、培养基无菌操作技术基本规则一、无菌的环境无菌室01超净工作台02生物安全柜03火焰周围04标准无菌室的要求:房间设置(外面有缓冲室)、空气过滤、墙面、墙角、微生物操作相关设备、紫外灯等。无菌室布局如条件有限,可在微生物实验室内专辟一个小房间作为无菌室。可以用板材和玻璃建造,面积4-5平方米即可。板材和玻璃隔出的无菌室超净工作台是一种提供局部无尘无菌工作环境的垂直单向流型空气净化设备。超净工作台生物安全柜外形与超净台类似,也提供局部无尘无菌工作环境。但它设置了风槽,气流不会吹向使用者,可以有效保护使用者。生物安全柜火焰周围是无菌区域通常使用酒精灯、煤气灯,其火焰周围是无菌区域(直径10cm左右)。这并不是利用高温杀死细菌,而是利用向上的单向气流形成一个无菌区域。二、无菌的器具、培养基玻璃、金属等器具干热灭菌法玻璃、金属、含水物品高压蒸汽灭菌法金属、玻璃器具火焰灭菌法液体或水溶性物质过滤除菌法设备:电烘箱用途:用于玻璃器皿、金属器具等耐热物品的烤干和灭菌。条件:160-165℃,灭菌1-2小时。设备:高压蒸汽灭菌锅用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。条件:121℃水蒸气15分钟培养基一般使用高压蒸汽灭菌法即在火焰外焰上灼烧进行灭菌。用途:接种环、接种针;涂布器;试管管口、锥形瓶瓶口等的灭菌。器具:细菌过滤器用途:不耐高温的液体、水溶性物质的除菌。细菌过滤器三、无菌操作技术我们通过一定的技术来保证目的微生物、培养基不被环境微生物污染,这些技术就是无菌操作技术。包括手部清洁消毒,用接种针、接种环、吸量管、涂布棒等工具进行各种操作等等。洗手:手部有可见灰尘时、饭前、便后,用水和肥皂洗手;Handrub(揉手):手部较清洁时,75%乙醇或者醇基消毒剂揉手。动作:手掌-手背-指缝-手指-拇指-指尖-手腕持皿法培养皿开合:单手打开和盖上皿盖,包括持皿法和皿加法两种。此操作用于制作培养基平板、接种等。皿加法包括灼烧接种环、接种、划线等。灼烧接种环先斜放外焰灼烧接种环,然后垂直放置后继续灼烧,再斜烧金属杆。现在红外接种环灭菌器使用也比较广泛。红外接种环灭菌器***************/UploadFiles/yydt/2012/6/201261110487.jpg*/threads/45232-Aseptic-technique-101*************项目六无菌和无菌操作技术***************/UploadFiles/yydt/2012/6/201261110487.jpg*/threads/45232-Aseptic-technique-101*************
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