3.1.2 重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修三.pptx

第三章基因工程;1.基因工程操作的必需工具有哪些？;;1、基因工程中载体的作用是什么？有哪些种类？

２、常用的载体是什么？其分布及本质分布是什么？

;活动二：分析载体需具备的条件。;拟核DNA;核心归纳;【思考1】根据标记基因的作用，有同学认为在含有某种抗生素的培养基中筛选存活的受体细胞不一定是导入目的基因的受体细胞，这种说法是否合理？并说明理由。

;核心归纳;5’................pBI121............GAATTC........3’

3’................质粒............CTTAAG........5’;活动四：阅读教材第72页的内容，思考DNA连接酶的作用，并完成下表。;将双链两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。;种类;AATTG;;与DNA相关的几种酶的比较;思考：各小组将活动三中所有DNA片段混合，拼接后，除了我们想要的重组质粒外，还会产生什么样的DNA分子？如何解决这些问题？;下表中列出了几种构建重组DNA分子常用的限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请据图回答下列问题：;（2）用同一种限制酶分别切割质粒和外源DNA构建重组DNA的方法，称为“单酶切法”。如使用限制酶EcoRⅠ分别切割质粒和外源DNA，其结果如下：

;（3）用两种能产生不同黏性末端的限制酶分别同时切割质粒和外源DNA构建重组DNA的方法，称为“双酶切法”。如使用限制酶BamHⅠ和HindⅢ分别同时切割质粒和外源DNA，结果如下：;;1.图甲是含有目的基因的外源DNA片段，图乙是用于将目的基因导入受体细胞的质粒（阴影部分表示抗生素抗性基因），相关限制酶的作用部位如图所示，现欲培养转基因抗病植株，回答下列问题。;（3）由于反应体系中含有大量的外源DNA片段和质粒，加入PstI一种限制酶后，会得到大量的目的基因片段和质粒片段，再加入DNA连接酶后，除了会形成目的基因与质粒连接的环状产物外，还会形成______________________连接的环状产物以及_____________________连接的环状产物。此外，目的基因与质粒的连接既可以是正向连接，也可以是____________，后者可能会导致目的基因无法正常表达。;D;练透