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第1页,共31页,星期日,2025年,2月5日一、概述
(一)食物蛋白质的主要作用
(1)供给人体蛋白质生物合成所需要的各种氨基酸,是人体组织生长、修补和更新的原料。
(2)在体内氧化产生能量,是人体的热能来源之一。
(3)参与酶、激素和血红蛋白等的组成,调节人体有关生理功能的正常进行。
(4)参与免疫系统和对某些有毒物质的解毒作用。
(5)蛋白质在遗传信息的控制,细胞膜的通透性以及高等动物的记忆、识别机构等方面都起着重要的作用。第2页,共31页,星期日,2025年,2月5日(二)蛋白质的理化性质
蛋白质(protein)是复杂的含氮化合物,分子量很大,大部分高达数万~数百万,它们由20种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合起来,并具有一定的空间结构,所含的主要化学元素为C、H、O、N,在某些蛋白质中还含有微量的P、Cu、Fe、I等元素。但含氮则是蛋白质区别于其它有机物的主要标志。
蛋白质可以被酶、酸或碱水解,其水解的中间产物为胨、肽等,最终产物为氨基酸。第3页,共31页,星期日,2025年,2月5日(三)氨基酸的作用
氨基酸(aminoacids)是合成蛋白质的基本结构单位,组成蛋白质的氨基酸有20多种,其中有些氨基酸在人体内不能合成或合成量不足,必需由食物供应,是蛋白质生物合成所必需的,又称为必需氨基酸,这些氨基酸有色氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸8种,对于婴儿还有组氨酸。另一部分氨基酸在体内蛋白质生物合成时也是需要的,但能在体内合成,不一定由食物供给,称非必需氨基酸。第4页,共31页,星期日,2025年,2月5日二、蛋白质的测定
(一)凯氏定氮法
测定蛋白质含量的方法很多,国家标准方法为凯氏(Kjeldahl)定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一。
凯氏定氮法测定蛋白质的主要依据是:各种蛋白质均有恒定的含氮量,只要能准确测定出食物中的含氮量,即可推算出蛋白质的含量。
注意:凯氏定氮法所测得的含氮量为食品中的总氮量,其中还包括少量的非蛋白氮,如尿素氮、游离氨氮、生物碱氮、无机盐氮等。故由定氮法计算所得蛋白质的量,称为粗蛋白质(crudeprotein)含量。第5页,共31页,星期日,2025年,2月5日乳制品6.38花生5.46肉6.25面粉5.70米5.95大麦、小米5.83玉米、高梁6.24大豆5.71芝麻、向日葵5.30氮换算为蛋白质的系数第6页,共31页,星期日,2025年,2月5日(1)基本原理
蛋白质样品与硫酸和催化剂(硫酸钾和硫酸铜)一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化成CO2和H2O逸出,样品中的有机氮被分解为氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
最低检出量为0.05mg氨,相当于0.3mg蛋白质。第7页,共31页,星期日,2025年,2月5日第8页,共31页,星期日,2025年,2月5日(2)操作注意事项
①样品的消化:
2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4→(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O
浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氧;
浓硫酸又具有氧化性,将有机物炭化后的碳、氢氧化为CO2和H2O,硫酸被还原为SO2,SO2使氮还原为氨,氨与硫酸结合生成硫酸铵。
加硫酸钾--提高溶液沸点,加快有机物分解。
溶液沸点可从340℃提高至400℃以上。
加硫酸铜--催化剂,缩短消化时间。此外还可指示消化终点的到达(Cu2SO4褐色CuSO4蓝绿色)。第9页,共31页,星期日,2025年,2月5日②蒸馏:
(NH4)2SO4+2NaOH2NH3↑+Na2SO4+2H2O
蒸馏时样品中的氨是否蒸完,可用精密pH试纸测试冷凝液是否显碱性来确定。也可用标准硫酸铵作回收试验,确定蒸馏条件,并严格掌握蒸馏时间。
③吸收与滴定:
2NH3+4H3BO3(NH4)2B4O7+5H2O
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O2NH4Cl+4H3BO3
使用混合指示剂,
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