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发酵麸皮可溶性蛋白含量的测定
B.1方法提要
采用考马斯亮蓝法测定，以牛血清白蛋白溶液为标准。
B.2发酵麸皮水抽提液
取10g干燥发酵麸皮加入200mL蒸馏水中，80℃水浴30min，离心（5000r/min，10
min）取上清即得发酵麸皮水抽提液。
B.3可溶性蛋白含量测定
B.3.1试剂的配制
考马斯亮蓝G250溶液配制：准确称取0.1g考马斯亮蓝G250，溶于50mL95%乙醇，加入100
mL85%磷酸，最后用蒸馏水稀释定容到1000mL。
牛血清蛋白标准液配制：准确称取50mg牛血清蛋白，加入0.526gNaCl，溶于少量蒸馏水中，
然后稀释定容到500mL，配制成浓度为100μg/mL的牛血清蛋白标准液。
B.3.2标准曲线的绘制
准确配制不同浓度梯度的牛血清蛋白溶液（浓度控制在10μg/mL～100μg/mL范围内）1mL，具体
操作：取100μl～900μl牛血清蛋白原液，水补足到1mL，浓度相当于所取原液量的十分之一；在
不同浓度的1mL牛血清蛋白溶液中，分别加入5mL考马斯亮蓝溶液，混合均匀，置于25℃水浴保
温10min；以1mL蒸馏水加5mL考马斯亮蓝溶液为空白对照，冷却后测定波长595nm处的吸光度
值；以配制的标准蛋白浓度为横坐标，对应吸光值为纵坐标制作标准曲线，并做线性回归分析，求线
性方程。
B.3.3目标样品测定
取发酵麸皮水抽提液按标准曲线方法测定595nm处的吸光度值。依据线性方程计算其可溶性蛋白
质含量。
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