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发酵麸皮可溶性多糖含量的测定
A.1测定方法的计算
见公式A.1。
SP=TP-RS(A.1)
式中：
SP——可溶性多糖含量；
TP——总糖含量；
RS——还原糖含量。
还原糖：采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定，总糖：采用苯酚-硫酸法测定，以葡萄糖为标准样品。
A.2发酵麸皮水抽提液
取10g干燥发酵麸皮加入200mL蒸馏水中，80℃水浴30min，离心（5000r/min，10min）取上
清即得发酵麸皮水抽提液。
A.3还原糖含量的测定
A.3.1试剂的配制
3,5-二硝基水杨酸：将6.3gDNS和262mL2MNaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水
溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备
用。
1mg/mL葡萄糖标准液：准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸
馏水溶解后，转移到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
A.3.2DNS法标准曲线的绘制
取7支20mL具塞刻度试管编号，分别按照标准曲线绘制所需的量加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准
液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，使之配成葡萄糖浓度为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、
1.2mg/L的反应液。将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min，取出，冷却至室温，用蒸馏水定容至20
mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。调波长540nm，用0号管调零点，测出1-6号管的吸光
度值。以吸光度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。
A.3.3还原糖的测定
吸取发酵麸皮水抽提液1mL按A.3.2的步骤测吸光度值，以标准曲线计算样液中的还原糖含量。
A.4总糖含量的测定
A.4.1苯酚硫酸法标准曲线的绘制
准确称取恒重葡萄糖10mg定容至250mL容量瓶中，分别吸取标准葡萄糖溶液（40μg/ml）0.4、
0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8mL置于比色管中，分别补水至2.0mL，再加入6%苯酚1.0mL后，
置冷水中迅速加入浓硫酸5.0mL，摇匀后于冷水中放置5min,然后置沸水浴中加热15min，再置冷水中
放置5min，最后于490nm波长下测吸光度值。以2.0mL水按同样显色操作为空白样，横坐标为多糖微
克数，纵坐标为吸光度值，制得标准曲线。
A.4.2总糖的测定
量取发酵麸皮水抽提液稀释合适倍数，吸取0.5ml稀释液蒸馏水补足1.0ml，加6%苯酚0.5ml，加
浓硫酸2.5ml摇匀、冷却，室温静置20min后，测定490nm处的吸光度值。
A.5可溶性多糖含量的计算
见公式A.2。
SP=TP-RS(A.2)
式中：
SP——可溶性多糖含量；
TP——总糖含量；
RS——还原糖含量。
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