中药制剂特殊杂质检查—生物碱的检查.pptx

中药制剂杂质检查技术——生物碱的检查

案例导入

云南宾川村民吃草乌中毒事件

2015年9月8日，云南宾川县金牛镇一村民邀约亲戚朋友到家中煮食草乌炖猪脚，参加就餐的亲属先后出现中毒症状，并到医院就诊，经医院全力抢救，其中6人抢救无效死亡。根据检测结果，该县村民食用草乌中毒事件定性为乌头碱中毒

宾川县中医院杨鸿医生说，草乌属于毒性中药材，乌头类药物都含有乌头碱，乌头碱的毒性极为强烈，常人只需服用3到4毫克就会出现心慌、心悸、心律不齐，甚至心跳骤停

如何控制中药制剂中的毒性杂质乌头碱?

乌头碱属于哪一类天然活性成分?

案例导入

云南宾川村民吃草乌中毒事件

哪些中药中含有乌头碱?乌头碱属于一般杂质还是特殊杂质？

生物碱的检查

一、概述

药物除需检查一般杂质外，还需检查可能存在的特殊杂质。特殊杂质是指某些药物制剂在生产和贮藏、运输过程中，由于自身性质、生产方式及工艺条件，可能引入的杂质

1.特殊杂质的检查

特殊杂质的检查通常是利用药物与杂质在理化性质方法的差异，采用物理、化学、生物等方法进行检查。由于药物品种不同，所含的特殊杂质不同，采用的检查方法也不同，故特殊杂质的检查方法收载在各品种的检查项下

一、概述

2.乌头碱类生物碱的检查

乌头类药物有川乌、草乌、附子等。乌头类药物含有多种生物碱，其中乌头碱型生物碱中C8、C14上的羟基分别与乙酸、苯甲酸结合生成双酯型生物碱。双酯型生物碱亲酯性强，有麻辣味，毒性大。为保证用药安全，《中国药典》（2020年版）规定应对乌头类药物及其成方制剂进行双酯型乌头碱的限量检查。常用方法为薄层色谱法（TLC），也可采用高效液相色谱法（HPLC）

生物碱的检查

一、概述

3.其他生物碱的检查

除了乌头类剧毒性生物碱的检查外，中药制剂中生物碱的检查还包括总生物碱限量检查，如风湿定片等；莨菪碱限量检查，如复方苦参肠炎康片等；士的宁的限量检查，如复方夏天无片、风寒双李拐片等，还有盐酸罂粟碱和吗啡的限量检查，如咳喘宁口服液等

生物碱的检查

二、薄层色谱检查法

1.方法简述

将供试品和杂质对照品分别点样于同一薄层板上，展开、显色、检视。观察供试品产生的斑点的位置和大小，并与杂质对照品的斑点进行比较，从而判断杂质是否超过限量。本法简便、快速、灵敏、不需特殊设备，适用于有机杂质的检查

生物碱的检查

二、薄层色谱检查法

2.检查步骤

生物碱的检查

二、薄层色谱检查法

3.应用实例

生物碱的检查

（1）三七伤药片中乌头碱的限量检查

处方：三七、制草乌、红花、骨碎补、接骨木、雪上一枝蒿

供试品溶液的配制：取本品30片，除去包衣，研细，加氨试液10ml使润湿，加乙醚150ml，振摇30分钟，放置2小时，分取乙醚液，回收溶剂至干，残渣用无水乙醇溶解并加至2.0ml，作为供试品溶液

对照品溶液的配制：另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液

二、薄层色谱检查法

3.应用实例

生物碱的检查

（1）三七伤药片中乌头碱的限量检查

薄层色谱检查：照薄层色谱法（《中国药典》2020年版通则0502）操作，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-二乙胺（4:3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，置日光下检视

检查要求：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点

二、薄层色谱检查法

3.应用实例

生物碱的检查

（2）咳喘宁口服液中罂粟碱和吗啡的限量检查

处方：麻黄、石膏、苦杏仁、桔梗、百部、罂粟壳、甘草

供试品溶液的配制：取本品25.0ml，加浓氨试液调节pH值至9～10，用三氯甲烷振摇提取3次，每次40ml合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用甲醇溶解使成10.0ml，作为供试品溶液

对照品溶液的配制：另取盐酸罂粟碱对照品和吗啡对照品，分别加甲醇制成每1ml各含5.0mg和2.0mg的溶液，作为对照品溶液

二、薄层色谱检查法

3.应用实例

生物碱的检查

薄层色谱检查：照薄层色谱法（《中国药典》2020年版通则0502）操作，吸取供试品溶液4μl、盐酸罂粟碱对照品溶液10μl与吗啡对照品溶液6μl，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（20：20：3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，置日光下检视

检查要求：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，出现的斑点应小于对照品斑点

（2）咳喘宁口服液中罂粟碱和吗啡的限量检查

三、高效液相色谱检查法

1.方法