DB32T 4395-2022 小麦土传病毒病病原检测技术规程.pdfVIP

ICS65.020

CCSB16

江苏省地方标准

DB32/T4395—2022

小麦土传病毒病病原检测技术规程

Codeofpracticefordetectionofpathogenofsoil-bornewheatviraldiseases

2022-11-14发布2022-12-14实施

江苏省市场监督管理局发布

中国标准出版社出版

DB32/T4395—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由江苏省作物标准化技术委员会提出并归口。

本文件起草单位：江苏省农业科学院、宁波大学、江苏省植物保护植物检疫站。

本文件主要起草人：周彤、羊健、杜琳琳、朱凤、周益军。

I

DB32/T4395—2022

小麦土传病毒病病原检测技术规程

1范围

本文件规定了小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒检测原理、设备和试剂、间接酶联免疫吸附剂测

定、斑点酶联免疫吸附剂测定及RT-PCR测定方法。

本文件适用于小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

小麦黄花叶病wheatyellowmosaicdisease

小麦的一种土传病毒病，自然界中由禾谷多黏菌(Polymyxagraminis)在土壤中传播，病原为小麦

黄花叶病毒(wheatyellowmosaicvirus)。

2.2

中国小麦花叶病Chinesewheatmosaicdisease

小麦的一种土传病毒病，自然界中由禾谷多黏菌(Polymyxagraminis)在土壤中传播，病原为中国

小麦花叶病毒(chinesewheatmosaicvirus)。

3缩略语

CWMV:中国小麦花叶病毒(ChineseWheatMosaicVirus)

Dot-ELISA:斑点酶联免疫吸附剂测定(DotEnzyme-linkedImmunosorbentAssay)

ELISA:酶联免疫吸附剂测定(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay)

间接ELISA:间接酶联免疫吸附剂测定(IndirectEnzyme-linkedImmunosorbentAssay)

PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)

RT-PCR:逆转录-聚合酶链式扩增反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)

WYMV:小麦黄花叶病毒(WheatYellowMosaicVirus)

4原理

4.1间接ELISA原理

将酶分子与抗体共价结合，得到同时具有免疫活性和酶的生物活性的酶标抗体。检测时，将已知的

抗体吸附在固相载体表面，若受检样本中含有相应的抗原，则会与固相载体上的抗体发生特异性结合从

而随之固定在固相载体上，然后洗涤除去未结合及多余的其他蛋白，再加入酶标抗体，使其与吸附在固

相载体上的抗原特异性结合，最后加入酶反应底物，底物被酶催化出现颜色反应产生有色产物。因此，

可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应。颜色反应的深浅与受检样品中抗原的量呈正比，

故可根据颜色反应的深浅进