启膈方干预食管癌小鼠食管组织蛋白差异性表达的组学研究.pdf

中文摘要

启膈方干预食管癌小鼠食管组织蛋白差异性表达的组学研究

摘要

食管癌（EC）是一种公认的恶性肿瘤，它的强侵袭性和低生存率给

患者带来了沉重的负担。近期研究表明，启膈方（QGF）对于抑制食管癌

的发展具有显著效果，鉴于目前的食管癌治疗所陷入的瓶颈，该疗法有望

成为一种新的治疗手段，为食管癌患者带来新的治疗选择。为了深入了解

食管癌的发病机制，研究人员采用了蛋白质组学的方法，如此可以揭示

管癌的分子机制，有助于识别潜在的治疗靶点。因此，蛋白质组学在当前

食管癌研究中已经引起了众多研究者们的关注。通过深入了解分子水平上

的变化，可以更好地理解食管癌的发展过程，并为未来的治疗策略提供有

力的支持。

目的：探讨QGF对食管癌小鼠食管组织蛋白质组学的影响，结合生

物信息学分析并发掘QGF抑制食管癌发生发展的潜在作用机制。

方法：

1.将45只C57BL/6小鼠（雌性，SPF级）采用随机分组的方式，

分为正常对照组（Control组，n=15），诱癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物

（4NQO）诱导的原位食管癌模型组（4NQO组，n=15），以及同时使用

4NQO和中药启膈方组（4NQO+QGF组，n=15）。本实验中所有小鼠均

接受常规饲养。利用TMT同位素标记技术对各组小鼠食管组织蛋白进行

定量分析，对比并筛选出差异表达蛋白，进一步利用生物信息学分析深入

研究蛋白质组学的变化。

2．通过乳酸（LD）测试盒测量各组小鼠食管组织内乳酸产生的含量

变化。

3．用蛋白质免疫印迹法（WB）进一步验证部分差异蛋白在各组小

鼠食管组织中的表达情况。

结果：

1.利用定量蛋白质组学方法在小鼠食管组织中共鉴定到5909个蛋

白，44601条多肽。差异蛋白筛选标准为uniquepeptide大于或等于1；P

0.05；差异倍数（FC）1.2或0.83。与Control组相比，4NQO组检测

1

中文摘要

出差异表达蛋白数共为1493个，其中包含表达上调的蛋白为889个，表

达下调的蛋白604个；与4NQO+QGF组相比，4NQO组差异表达蛋白数

为2040个，其中上调蛋白1125个，下调蛋白915个。基因本体论（gene

ontology，GO）分析，鉴定到的蛋白主要分布在胞内（Intracellular）和细

胞器（organelle）；发挥蛋白质结合（proteinbinding）和有机环化合物结

合（organiccycliccompoundbinding）等功能；主要参与细胞代谢过程

（Cellularmetabolicprocess）和有机物代谢过程（organicsubstance

metabolicprocess）等生物学过程。

2.KEGG分析主要涉及代谢途径，糖酵解/糖异生途径。进一步对显

著差异蛋白进行蛋白互相作用分析，各蛋白相互调控，构成以Polr2b、Eef2、

Rack1、Tpi1、Eno3、Alb和Ranbp2等为核心的蛋白相互作用网络，其中

Tpi1和ENO3为参与糖酵解途径的关键酶。

3.乳酸试剂盒检测结果提示QGF可以降低食管癌组织中的乳酸产

生。

4.蛋白质免疫印迹法结果提示QGF可以下调Tpi1和ENO3两个蛋

白的表达（P0.05），与蛋白质组学结果一致，表明蛋白质组学实验结果

可信。

结论：

1.在小鼠食管组织中共鉴定到5909个蛋白，44601条多肽。与Control

组相比，4NQO组差异表达蛋白数为1493个，其中上调蛋白889个，下

调蛋白604个；与4NQO+QGF组相比，4NQO组差异表达蛋白数为2040

个，其中上调蛋白1125个，下调蛋白915个。

2.QGF可能是通过下调Tpi1和ENO3两个蛋白表达抑制糖酵解代谢

途径进而抑制食管癌的发生发展。

关键词：食管癌,蛋白质组