2.2 动物细胞工程（第二课时）（教学课件）-2024-2025学年高二生物（人教版2019选择性必修3）.pptx

选择性必修三《生物技术与工程》第2章细胞工程第2节动物细胞工程动物细胞融合技术与单克隆抗体（第二课时）工厂化生产

目录课堂小结探究新知04情境导入030201课堂练习一.动物细胞融合技术二.单克隆抗体技术三.单克隆抗体的应用

情境导入新型冠状病毒抗原检测思考为什么抗原试纸能准确检测出新冠病毒呢？

向动物体内反复注射某种抗原使动物产生抗体从动物血清中分离所需抗体有什么方法解决这个问题？一.动物细胞融合技术传统抗体制备方法及缺陷提示：每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体抗体不纯缺点：产量低、纯度低、特异性差

有什么方法解决传统抗体制备存在产量低、纯度低、特异性差的问题？1个B淋巴细胞B淋巴细胞群大量单一抗体克隆产生在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的！米尔斯坦【英国】科勒【德国】解决1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案：抗体B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞(单克隆抗体)一.动物细胞融合技术

1.概念：使______或_______动物细胞结合形成________细胞的技术。2.结果：形成的具有原来两个或多个细胞的。3.原理：.4.诱导融合方法：两个多个一个杂交细胞遗传信息细胞膜具有一定的流动性5.意义：突破了的局限，使成为可能。有性杂交远缘杂交杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息一.动物细胞融合技术物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)融合法生物法：灭活病毒诱导法动物细胞融合特有

6.过程：动物细胞融合动物细胞培养7.应用：(1)细胞融合技术已经成为研究________、_________、______和______________等的重要手段。(2)利用动物细胞融合技术发展起来的_________，为________________开辟了新途径。AA、AB、BB细胞遗传细胞免疫肿瘤培育生物新品种杂交瘤技术制造单克隆抗体AB类型：一.动物细胞融合技术

一.动物细胞融合技术用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构（无核酸）。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合1.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？2.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？细胞核的融合融合实质及完成的标志：灭活病毒诱导法

动物细胞融合杂交细胞动物细胞培养单克隆抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体杂交瘤细胞既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体一个极富创造力的方案：二.单克隆抗体技术

从脾中提取①用特定抗原对小鼠进行免疫的原因？获得能产生特定抗体的B淋巴细胞培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导融合将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合不能产生抗体，但能大量增殖能产生抗体，但不能大量增殖二.单克隆抗体技术1.单克隆抗体制备的过程：多种B淋巴细胞

原理:②诱导融合后的细胞有几种类型，若仅考虑两两细胞融合呢？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？2杂交瘤细胞(多种)13置于选择性培养基上培养第一次筛选融合的细胞BBB132B-瘤瘤-瘤瘤√选择培养基只允许杂交瘤细胞生长、增殖，未融合的亲本细胞和融合了同种核的细胞不能生存.二.单克隆抗体技术

④是否所有的杂交瘤细胞都能产生所需的抗体？2杂交瘤细胞(多种)13每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞克隆化培养抗体检测第二次筛选抗原-抗体杂交技术原理：抗原和抗体能够特异性结合原理：细胞增殖阳性细胞（分泌的抗体能与特定抗原结合）经多次筛选，可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞二.单克隆抗体技术

特点:⑤如何扩大培养得到大量的单克隆抗体？单克隆抗体从细胞培养液中提取从小鼠腹水中提取（体内培养）（能产生所需抗体的杂交瘤细胞）特异性强灵敏度高可大量制备二.单克隆抗体技术

培养杂交瘤细胞的方法比较项目腹腔培养体外培养优点缺点易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低规模小，产量少可大规模培养，大量生产需要人为控制培养条件，成本相对较高二.单克隆抗体技术

①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。②人B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。如果D途径被阻断，它会因不能合成DNA而死。筛选出杂交瘤细胞方法?不能无限增殖，死亡不能无限增殖，死亡能无限