维生素及第五酶.ppt

************************************************************************************************************************************************感谢大家观看第158页，共158页，星期日，2025年，2月5日**************************************************************四抑制剂对酶反应速率的影响1抑制作用-不同于失活和去激活酶活性的降低分三类失活作用（inactivation）：理化因素破坏次级键，构象改变，酶蛋白被非特异（无选择性）的变性去激活作用（deactivation）：EDTA去除酶所需的二价离子，降低酶活性抑制作用（inhibition）：酶蛋白未被变性，但其必需基团（包括辅助因子）被改变，使酶活性被选择性降低第126页，共158页，星期日，2025年，2月5日2抑制作用的类型-可逆和不可逆抑制（1）不可逆抑制（irreversibleinhibition）抑制剂与酶活性中心必需基团牢固的共价结合，难以去除非专一性不可逆抑制：作用于不同基团或不同酶第127页，共158页，星期日，2025年，2月5日专一性不可逆抑制：作用于一种基团或一类酶-有机汞、有机磷（2）可逆抑制（reversibleinhibition）抑制剂与酶蛋白以非共价键可逆结合，可以被去除（透析、超滤）分为竞争性抑制、非竞争性抑制、（反竞争性抑制）第128页，共158页，星期日，2025年，2月5日竞争性抑制：抑制剂与底物竞争，从而阻止底物与酶的结合酶的活性中心不能同时既与抑制剂作用又与底物作用竞争性抑制剂具有与底物相类似的结构，与酶形成可逆的复合物，但此复合物不可能分解成产物，酶反应速度因此下降最常见的一种可逆抑制作用可以通过加入大量的底物来消除竞争性抑制剂对酶活性的抑制作用第129页，共158页，星期日，2025年，2月5日回顾第130页，共158页，星期日，2025年，2月5日第131页，共158页，星期日，2025年，2月5日细菌体内的叶酸合成酶能够催化对氨基苯甲酸变成叶酸磺胺类药物由于与对氨基苯甲酸的结构非常相似，因此对叶酸合成酶有竞争性抑制作用人和畜禽能够利用食物中的叶酸，而细菌不能利用外源的叶酸，必须自己合成一旦合成叶酸的反应受阻，则细菌由于缺乏叶酸，便停止生长繁殖第132页，共158页，星期日，2025年，2月5日非竞争性抑制：底物和抑制剂可以同时与酶结合，两者没有竞争作用抑制剂和底物分别结合在酶的不同部位上，形成三元复合物，该三元复合物不能进一步分解为产物，使酶不能催化底物反应第133页，共158页，星期日，2025年，2月5日第134页，共158页，星期日，2025年，2月5日反竞争性抑制：抑制剂不与酶单独结合，只与酶-底物复合物结合，形成三元复合物，不能进一步形成产物，导致酶活性下降拓展第135页，共158页，星期日，2025年，2月5日第136页，共158页，星期日，2025年，2月5日竞争性抑制作用非竞争性抑制作用竞争性非竞争性抑制作用机理示意图底物与酶专一性结合第137页，共158页，星期日，2025年，2月5日竞争性抑制曲线

3抑制作用的动力学第138页，共158页，星期日，2025年，2月5日非竞争性抑制曲线第139页，共158页，星期日，2025年，2月5日反竞争性抑制曲线

第140页，共158页，星期日，2025年，2月5日有无抑制剂存在时酶促反应的动力学情况

第141页，共158页，星期日，2025年，2月5日第五节酶的分离纯化与活性测定一酶的分离纯化1原则：符合蛋白质纯化原则防止变性分离蛋白质的手段利用酶的活性第142页，共158页，星期日，2025年，2月5日酶纯化的三个基本环节抽提（萃取）：将酶从原料中提取出来制成酶溶液纯化：将酶溶液与杂质选择性分开制剂：以一定制剂形式，便于贮藏应用第143页，共158页，星期日，2025年，2月5