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真核基因转录调控.ppt

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反式作用因子在转录调节中具有特殊的重要性。这类DNA结合蛋白有多种,能特异性识别这类蛋白的序列也有多种。正是不同的DNA结合蛋白与不同识别序列之间在空间结构上的相互作用,以及蛋白质与蛋白质之间的相互作用,构成了复杂的基因转录调控机制的基础。第55页,共88页,星期日,2025年,2月5日真核生物启动子和增强子是由若干DNA序列元件组成的,由于它们常与特定的功能基因连锁在一起,因此被称为顺式作用元件。这些序列组成基因转录的调控区,影响基因的表达。反式作用因子是能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。第56页,共88页,星期日,2025年,2月5日如果某个蛋白是体外转录系统中起始RNA合成所必需的,它就是转录复合物的一部分。根据各个蛋白成分在转录中的作用,将整个复合物分为3部分:①参与所有或某些转录阶段的RNA聚合酶亚基,不具有基因特异性。第57页,共88页,星期日,2025年,2月5日②与转录的起始或终止有关的辅助因子,不具有基因特异性。③与特异调控序列结合的转录因子。它们中有些被认为是转录复合物的一部分,因为所有或大部分基因的启动区都含有这一特异序列。更多的则是基因或启动子特异性结合调控蛋白,它们是起始某个(类)基因转录所必需的。第58页,共88页,星期日,2025年,2月5日二、反式作用因子可以分为3类(1)?通用反式作用因子,主要识别启动子的核心启动成分(2)特殊组织与细胞中的反式作用因子(3)和反应性元件(responseelenents)相结合的反式作用因子。如HSE(热休克反应元件,heatshockresponseelement),GRE(糖皮质激素反应元件glucocorticoidresponseelement);MRE(金属反应元件,metalresponseelement);TRE(肿瘤诱导剂反应元件,tumorgenicagentresponseelement);第59页,共88页,星期日,2025年,2月5日三、DNA结合蛋白的共同特性:(1)具有一些与DNA结合的螺旋区(2)能形成二聚体(3)有一个共同的基本序列第60页,共88页,星期日,2025年,2月5日DNA结合蛋白基本序列由40—50个氨基酸组成,含有2个两亲的(既有极性基也有非极性基)螺旋,由2个长度不等的连接区(环)相连。通过两条螺旋对应位置上的疏水性氨基酸残基之间的相互作用,可以生成同源二聚体或异源二聚体。每个螺旋区长15一16个氨基酸,其中有几个氨基酸残基是保守的。两个螺旋区之间的环使两个螺旋区可以彼此独立地相互作用。第61页,共88页,星期日,2025年,2月5日DNA结合蛋白第62页,共88页,星期日,2025年,2月5日②上游启动子元件(upstreampromoterelement)包括通常位于-70bp附近的CAAT盒和GC盒、以及距转录起始点更远的上游元件。这些元件与相应的蛋白因子结合能提高或改变转录效率。不同基因具有不同的上游启动子元件,其位置也不相同,这使得不同的基因表达分别有不同的调控。第23页,共88页,星期日,2025年,2月5日2.增强子是一种能够提高转录效率的顺式调控元件,最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA,可使旁侧的基因转录提高100倍。其后在多种真核生物,甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100-200bp长度,也和启动子一样由若干组件构成,基本核心组件常为8-12bp,可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。第24页,共88页,星期日,2025年,2月5日增强子的作用有以下特点:①增强子提高同一条DNA链上基因转录效率,可以远距离作用,通常可距离1-4kb、个别情况下离开所调控的基因30kb仍能发挥作用,而且在基因的上游或下游都能起作用。②增强子作用与其序列的正反方向无关,将增强子方向倒置依然能起作用。而将启动子倒就不能起作用,可见增强子与启动子是很不相同的。第25页,共88页,星期日,2025年,2月5日③增强子要有启动子才能发挥作用,没有启动子存在,增强子不能表现活性。但增强子对启动子没有严格的专一性,同一增强子可以影响不同类型启动子的转录。例如当含有增强子的病毒基因组整合入宿主细胞基因组时,能够增强整合区附近宿主某些基因的转录;当增强子随某些染色体段落移位时,也能提高移到的新位置周围基因的转录。使某些癌基因转录表达增强,可能是肿瘤发生的因素之一。第26页,共88页,星期日,202

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