结核菌快速测定.ppt

杂交试剂第30页，共44页，星期日，2025年，2月5日TwinCubator?（可做12个条）杂交仪（手工,12条）第31页，共44页，星期日，2025年，2月5日关于结核菌快速测定第1页，共44页，星期日，2025年，2月5日结核分枝杆菌结核分枝杆菌(M.tuberculosis)，俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报道，每年约有800万新病例发生，至少有300万人死于该病。我国建国前死亡率达200-300人/10万，居各种疾病死亡原因之首，建国后人民生活水平提高，卫生状态改善，特别是开展了群防群治，儿童普遍接种卡介苗，结核病的发病率和死亡率大为降低。但应注意，世界上有些地区因艾滋病、吸毒、免疫抑制剂的应用、酗酒和贫困等原因，发病率又有上升趋势。第2页，共44页，星期日，2025年，2月5日TB形态第3页，共44页，星期日，2025年，2月5日全球感染情况第4页，共44页，星期日，2025年，2月5日实验诊断检测方法常规检测方法分子生物学检测方法第5页，共44页，星期日，2025年，2月5日常规检测方法一个月二个月三个月第6页，共44页，星期日，2025年，2月5日分子生物学检测（PCR）方法第7页，共44页，星期日，2025年，2月5日回顾RNA与DNA第8页，共44页，星期日，2025年，2月5日RNAVsDNARNA-核糖核酸只存在於活细胞非常脆弱，环境中存在水解酶（RNase）单链结构????????DNA-脱氧核糖核酸非常稳定，在死亡生物内也可存在双链结构第9页，共44页，星期日，2025年，2月5日结核菌快速测定GenprobLeader-50i第10页，共44页，星期日，2025年，2月5日方法

方法名称：HPV（HybridizationProtectionAssay）-杂交保护分析法为Gen-probe公司专利检测设备：LEADER50i第11页，共44页，星期日，2025年，2月5日

不同方法结核菌检测报告时间

罗氏（LJ）培养:2-8周HPA-MTD:2.5h报告直接从标本中检测结核菌HPA-Accuprobe:1h报告用菌落或自动培养系统的菌液第12页，共44页，星期日，2025年，2月5日HPA-MTD方法检测TB第13页，共44页，星期日，2025年，2月5日优势（一）靶分子选取核糖体RNA-RIBOSOMALRNArRNA作为靶分子好处：生物扩增提高灵敏度靶位独特的核酸次序保证检测特异性靶分子:rRNA第14页，共44页，星期日，2025年，2月5日优势（二）敏感度10000套r-RNACATATATGCGCATTAATCGTAGCGCGCATATGCTACGTADNARNA聚合酶(eg:E.coli)第15页，共44页，星期日，2025年，2月5日样本前处理样本细胞溶解目标r-RNA释放第16页，共44页，星期日，2025年，2月5日杂交AE60°C杂交体rRNAAEAEAEAEAEAEAE探针15分钟第17页，共44页，星期日，2025年，2月5日选择60°C选择性试剂AEAEAEAEAEAEAEAE第18页，共44页，星期日，2025年，2月5日ATATRAINING/TP/Nov97*PMTPhotomultiplicator注射1注射2CPU微机处理器显示打印机键盘化学发光读数仪/原理结果测定第19页，共44页，星期日，2025年，2月5日MTD结核分枝杆菌的直接检测意义TB与其他分枝杆菌区分AIDS患者鸟分枝杆菌小肠黏膜感染龟分枝杆菌引起严重院内感染（南方某医院）TB耐药基因发现并监测耐药菌株，为医生提供有效治疗TB复燃方案提高TB检出率CSF、胸腹水等疑似患者长期