DB32T 1736-2011 水生动物车轮虫病诊断方法.docxVIP

ICS65.150

B50

备案号：

江

DB32

苏省地方标准

DB32/T1736—2011

水生动物车轮虫病诊断方法

DiagnosemethodonAquaticanimaldiseaseofTrichodinaspp

2011-04-15发布2011-06-15实施

江苏省质量技术监督局发布

I

DB32/T1736--2011

前言

车轮虫病诊断是水生动物生物学诊断的重要部分，目前还没有该寄生虫病的诊断方法，特制定本地方标准。

本标准按GB/T1.1–2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》编制。本标准由江苏省海洋与渔业局提出。

本标准起草单位：江苏省水生动物疫病预防控制中心。

本标准主要起草人：陈辉、黄春贵、邹勇、段翠兰、王习达、郭闯、方苹、陈静、刘训猛、郭立新。

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DB32/T1736-2011

水生动物车轮虫病诊断方法

1范围

本标准规定了水生动物车轮虫病诊断方法的仪器、程序和操作步骤。本标准适用于水生动物车轮虫病的诊断。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18088—2000出入境动物检疫采样

3仪器

3.1显微镜。

3.2解剖镜。

3.3解剖盘。

3.4弯头镊子。3.5载玻片。

3.6盖玻片。

4诊断程序

车轮虫病诊断程序见图1。

车轮虫隶属于原生动物门、缘毛亚纲、缘毛目、壶形科、车轮虫属。车轮虫侧面观如毡帽状，反面观为圆碟形，运动时如车轮转动样。隆起的一面为前面或称口面，相对而凹入的一面为反口面。口面上有向左或反时针发方向螺旋状环绕的口沟，其末端通向胞口。口沟两侧各着生一列纤毛，形成口带，直达前庭腔。反口面的中间为齿环和辐线环。在辐线环上方有一马蹄形的大核，一个长形的小核和一个伸缩泡，其中部向体内凹入，形成附着盘，用于吸附在宿主身上。车轮虫用附着盘附着在鱼体的鳃丝或皮肤上，并来回滑动。游泳时一般用反口面向前像车轮一样转动，所以称为车轮虫。生殖用纵二分裂法和接合生殖。

常见能致病的车轮虫有10多种，寄生于各种淡水鱼、海水鱼的体表、鳃等处，主要危害鱼苗、鱼种，严重时可引起大批死亡。大量寄生时，由于虫体的刺激，引起组织发炎，分泌大量粘液，在体部、鳃上形成一层粘液层，虫体密集处，如鳍、头部、体表出现一层白翳。病鱼消瘦、发黑、游动缓慢，呼吸困难，以致死亡。

2

DB32/T1736-2011

表观病鱼

解剖

鳃皮肤膀胱、输尿管等

制片

确诊为非车轮虫优势种

确诊为非车轮虫

优势种

镜检10×10

确诊为车轮虫

非优势种

出报

出报告

图1车轮虫诊断程序

5操作步骤

5.1样品的收集和处理

3

DB32/T1736-2011

对有症状的水生动物，挑选3-5尾，至少不低于2尾的濒死个体；对无症状的水生动物，按GB/T18088—2000的规定，随机取一定数量的个体。对样品先进行目检，确定病变部位，然后取鳃、皮肤、前鼻孔内侧、膀胱、输尿管等病变组织或粘液制片。

5.2制片

用剪刀或解剖刀、镊子取病症的部位，同一部位分别制成两个玻片，标上组织名称。

5.3确诊优势种

将制好的玻片分别于显微镜低倍镜(10×10)下观察，见构成齿环的齿体具发达的空锥形锥部以及向外的齿钩，则确定为车轮虫(具体见图2)。只要有一片中有单种寄生虫出现80%以上，可定为寄生虫优势种。

5.4确诊车轮虫病

在低倍镜的视野下，车轮虫为优势种的可确定为车轮虫病。

5.5结果确认

上述结果如果为车轮虫病，不复查，报告为车轮虫病。若不是车轮虫病再复查，结果仍然如此，则报告为非车轮虫病。

A

B

图2车轮虫的主要构造

A.侧面观(模式图);B.纵切面观(半模式，只表示纵切面的1/2)。

1.口沟；2.胞口；3.小核；4.伸缩泡；5,上缘纤毛；6.后纤毛带；7.下缘纤毛；8.缘膜；9.大核；10.胞咽：11.齿环；12.辐线；13.后纤毛带。(仿《湖北省鱼病病原区系图志》)