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细菌遗传课时.pptVIP

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(三)性导(sexduction)四、性导重组(sexductionrecombination)①作基因载体:F`因子能自主复制、稳定遗传。②显隐性研究:F`因子进入受体后,部分二倍体中隐性基因不表达,离开受体隐性基因能表达。③互补性测验:F`因子进入受体后,内外基因功能不互补是同一顺反子,互补是不同的顺反子。④基因作图:内外基因间重组进行基因定位。4、性导作图原理连锁基因间距离愈近,并发转导(co-sexduction)频率愈高,反之则反。据并发转导频率进行基因定位,性导作图方法和步骤在转导作图中讲。3、性导的意义五、转导重组与作图(transductionrecombinatingandmapping)(一)转导重组的发现及鉴定1.试验:Lederberg,1951,鼠伤寒沙门氏菌2.鉴定:⑴U形管分开两菌株仍有wt。说明不是接合、性导重组;⑵加二硝基苯或DNA酶后仍有wt。说明不是转化重组;⑶P22抗性品系的LT2菌株替代LT2无wt。说明亲本LT2中有P22⑷亲本LT2中加P22血清也无wt。证明通过滤孔的是P22质粒。P22是沙门氏菌温和型噬菌体,又称过滤因子。它能裂解LT2菌株,包装LT2基因进入LT22。以噬菌体为媒介转递基因并表达称转导重组(transductionrecombination)LT22(phe-trp-tyr-his-)×LT2(phe+trp+tyr+his+)混合4h后基本培养基培养野生型菌斑率高达10-5,为什么?010203DavisU形管分开双亲无野生型,不分开有野生型,说明是接合或性导重组。DavisU形管分开双亲后有野生型,可能是转导或转化重组。添加二硝基苯、氯霉素或DNA酶后无野生型产生说明是转化重组,反之为转导重组。DavisU形管分开双亲后有野生型,添加过滤因子自身血清前有野生型、添加后无野生型为转导重组。(二)转导、性导、转化与接触重组的区别五、转导重组与作图五、转导重组与作图(三)普遍性转导(generaltransduction)1、普遍性转导:phage传递供体基因组任一基因,并在受体表达2、转导过程侵染供体→降解染色体→误装形成转导子→释放再侵染→部分二倍体→转导子命运:①外基因降解称丢失;②外基因不复制称流产;③外基因被整合,供体性状表达。五、转导重组与作图①普遍性:供体基因组内任一基因均有可能被转导,随机性②低频性:多为3×10-5,该频率来由:沙门氏菌染色体约2-3千个基因,噬菌体头部能装20-30个基因,占1%;沙门氏菌中有转导能力的约0.3%。所以,基因普遍性转导频率=3×10-5。(三)普遍性转导(generaltransduction)3、普遍性转导特点4、并发转导(cotransduction)2个或多个基因同时转导称为并发转导,也称共导。与性导原理一样,连锁基因间的距离愈近共导或性导率愈高,反之则反。即距离愈远的基因,愈不容易在一个短片断上共导或性导。据此,并发转导或并发性导,被广泛用于细菌基因作图。10.14第七章细菌的遗传分析目录一、细菌及其基因组0.3课时二、转化重组与作图1.0课时三、接合重组与作图1.7课时四、性导重组与作图0.2课时五、转导重组与作图0.6课时六、同源重组及其机理0.2课时一、细菌及其基因组1.拟核细胞(nucleoidcell):无核膜,原核生物(prokaryotes)2.繁殖快:约20min/代,哺乳动物细胞分裂24h的1/703.体积小:长1-5μm,宽0.5-1μm;4.群体大:一支试管可盛数百万个个体。(一)细菌细胞(bacteriumcell)一、细菌及其基因组1、双链环状;2、无蛋白质包装;3、成环短缩变粗。如E.coli染色体1333μm,300μm成环为25μm,50环后为1.5μm。(二)细菌基因组(bacteriumgenome)一、细菌及其基因组1.合成功能突变体(anabolicfunctionalmutants)常见7种met-thr-his-leu-pyr-(嘧啶)cyc-(胱氨酸)thi-(硫氨酸)等2.分解

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