DB32T 1659-2010 杏鲍菇菌种生产技术规程　.docxVIP

ICS67.080

B05

备案号：

DB32

江苏省地方标准DB32/T1659—2010

杏鲍菇菌种生产技术规程

TechnicalrulesofPleurotusEryngiipurecultureproduction

2010-10-12发布2010-12-12实施

江苏省质量技术监督局发布

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DB32/T1659—2010

前言

为了实现杏鲍菇菌种生产技术规范化，确保菌种质量，维护菌种生产者、经营者和使用者的合法权益，特制定本标准。

本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编写。本标准由江苏江南生物科技有限公司提出。

本标准由江苏江南生物科技有限公司起草。

本标准主要起草人：姜建新、马一鸣、姜小红、姜雅、荆琴芳。

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DB32/T1659—2010

杏鲍菇菌种生产技术规程

1范围

本标准规定了杏鲍菇菌种生产的场地环境、设施设备、生产技术、标识、包装、运输及贮存。本标准适用于江苏省行政区域内生产、经销、使用的杏鲍菇母种、原种和栽培种。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T191

包装储运图示标志

GB5749

生活饮用水卫生标准

GB15569

农业植物调运检疫规程

NY5099

食用菌栽培基质安全技术要求

NY/T528

食用菌菌种生产技术规程

3场地环境

3.1应选择地势高燥、排水畅通、通风良好、交通便利的地方建造菌种场。3.2菌种场应远离有“三废”污染的工厂、生活区、禽畜养殖场等。

3.3应选用清洁水源，水质符合GB5749规定。

3.4生产场地环境卫生及其他条件符合NY/T528的规定。

4设施设备

4.1基本设施

具备控温控湿条件的冷却室、接种室、培养室和贮存室。

4.2基本设备

磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台或接种箱、空调、除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装瓶装袋机。

5生产技术

5.1母种生产5.1.1培养基

PDA培养基或PSA培养基

5.1.2培养基制作

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DB32/T1659—2010

5.1.2.1分装

将配制好的PDA培养基或PSA培养基分装至符合NY/T528规定的Φ18㎜×180㎜或Φ20㎜×200㎜的玻璃试管中，装量为试管长度的1/3左右。试管口应保持干净，随后塞入棉塞或硅胶塞，并用牛皮纸包扎。

5.1.2.2灭菌

将分装和包扎好的试管直立放在高压灭菌锅内加热灭菌。加热到0.05MPa时，打开排气阀，排尽锅内空气，待压力指针回到零点后，关闭排气阀。重复操作两次。当压力升到0.1MPa（温度为121℃)时，维持30min后停止加热，待指针回到零点，再打开锅盖。

5.1.2.3斜面培养基制作

从灭菌锅内取出试管，当试管冷却到60℃左右时，趁热将试管倾斜摆放在操作台桌面上，试管口比试管底部高1.0㎝～1.5㎝，做成培养基斜面，斜面长度为试管长度的2/3。

5.1.2.4灭菌效果检查

将灭菌后的培养基置于30℃±2℃条件下1d～2d检查有无细菌或霉菌的菌斑。

5.1.3消毒与接种5.1.3.1消毒

将接种用具、培养基放到接种箱或超净工作台内。接种箱应用气雾消毒剂消毒，用量5g/m3；有紫外线灭菌灯的，同时开启照射30min。超净工作台使用前应开机30min预热。

5.1.3.2接种

消毒后进行接种。接种人员要注意清洁卫生，穿戴上经消毒过的工作服、工作帽、口罩，按无菌操作要求，手部和试管菌种表面应用医用酒精消毒。将接种用具用酒精灯进行火焰灭菌，放于箱内支架上冷却后备用。在酒精灯火焰四周的无菌区进行接种操作。开始接种时，左手同时握着转接母种和待接斜面培养基，试管口置于酒精灯火焰上方3㎝处的无菌区，用右手迅速分别拔开试管棉花塞，并用接种钩在转接母种试管中挑取绿豆粒大小的菌种体迅速转接到待接斜面培养基内。接种位置为培养基斜面前端1㎝处，且菌种体菌丝面朝上。接种后迅速塞上棉花塞。将接种好的斜面培养基用牛皮纸包扎试管口，并贴标有菌号和接种日期的标签。标签粘贴位置为距试管口8㎝处。

5.1.4培养

将接种后的试管置于20℃~28℃培养箱或培养室恒温培养8d～10d，当菌丝长满试管斜面，即可用于生产原种。

5.2