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细胞培养产品概述-普诺赛.pptxVIP

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细胞培养产品概述202X报告人:刘亚时间:

1细胞体外培养指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。

营养成分渗透压温度PH气相无菌无毒的细胞培养环境2细胞体外培养的条件

2.1细胞体外生存的营养条件溶剂、热稳定性、导热、表面张力;培养用水电阻率≥1×106Ω。20种氨基酸——必须氨基酸、非必须氨基酸;培养基中都含有必须氨基酸;谷氨酰胺——缺乏会引起细胞生长不良甚至死亡;——溶液中不稳定,容易分解。如细胞生长不良,需在培养液中补加谷氨酰胺,终浓度在1~4mmol/L。水氨基酸

2.1细胞体外生存的营养条件(3)碳水化合物葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠等。葡萄糖——主要的能源物质,细胞对葡萄糖的吸收能力最高。丙酮酸钠——葡萄糖消耗殆尽时,可替代葡萄糖提供能量。

2.1细胞体外生存的营养条件无机盐类细胞生长所必需;维持渗透压平衡;维持酸碱平衡——磷酸盐、碳酸盐等;Ca2+——组织内部细胞之间相互粘连起重要作用;Mg2+——细胞间质重要成分,利于细胞间相互稳定。

2.1细胞体外生存的营养条件(6)促生长因子及激素对于维持细胞的功能、保持细胞的状态具有十分重要的作用。如胰岛素,它能促进细胞利用葡萄糖和氨基酸;氢化可的松可促进表皮细胞的生长;泌乳素有促进乳腺上皮细胞生长作用等。(5)维生素脂溶性维生素:A、D、E、K;水溶性维生素:C、B1、B2、B6、B12、生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素等;参与构成各种酶的活性基团成分,参与细胞生存和代谢。

2.2渗透压细胞必须生活在等渗环境中,大多数培养细胞对渗透压有一定耐受性;不同动物细胞最适渗透压不同;人体细胞最适:290mOsm/Kg;鼠细胞最适:320mOsm/Kg;大多数哺乳动物细胞,渗透压在260~320mOsm/kg的范围都适宜。

2.3温度最适温度:35℃~37℃;≤39℃细胞代谢强度与温度成正比;39~40℃中1h,即会受到损伤,但仍能恢复;41~42℃中1h,细胞会受到严重损伤,但不至于全部死亡,部分仍可能恢复;≥43℃时,细胞大多死亡。

2.3温度高于0℃时,低温只能抑制细胞代谢,并无伤害;25~35℃时,可缓慢生长;4℃放置数小时,在置于37℃,细胞仍能继续良好生长;冰点以下,溶质损伤、冰晶损伤,细胞死亡。

2.4PH每种细胞都有其最适的PH值;大多数细胞适宜7.2~7.4,偏离这一范围对细胞不利;细胞耐酸性比耐碱性强一些;在偏酸性环境中更有利于细胞生长;有些细胞也喜欢偏碱性环境,如成纤维细胞最适合PH7.4~7.6。

2.5气相单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,请尽量言简意赅地阐述观点。5%CO2+95%空气;01单击此处添加正文,文字是您思想的提炼,请尽量言简意赅地阐述观点。CO2既是细胞代谢产物,也是细胞所需成分;02HCO3-+H+?H2CO3?CO2↑+H2OCO2维持培养基的pH。03

细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。英文:Medium粉剂——倾向称为“培养基”液体——多称为“培养液”3细胞培养基的概念

4培养基分类01天然培养基03无血清培养基02合成培养基

早期的细胞培养基;直接源于动物组织提取液或体液,如血清、血浆凝块、淋巴液、胚胎浸出液等;营养价值高;成分复杂、差异大、不稳定、来源受限制;血清使用最广泛。4.1天然培养基

4.1.1血清的主要成分血液=55%血浆+45%血细胞;血清——去除纤维蛋白(凝血因子)的血浆;成分复杂,大部分已知,少数未知;血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等。

4..1.2血清的主要作用提供营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等;提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,可终止胰酶的消化;血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤;血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如硒等。

牛血清——使用最多人血清马血清猪血清羊血清鸡血清兔血清4.1.3血清的种类

按照采血时间的早晚来分类的;采血时间越早,营养物质越丰富,所含

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