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基于“性味-物质-效应”三元关联分析的酸枣仁及其近缘药材理枣仁的比较研究.pdf

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摘要

选题依据:酸枣仁为鼠李科枣属植物酸枣ZiziphusjujubaMill.var.spinosa

(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种子。2020年版《中国药典》记载,酸枣仁

“甘、酸、平;归肝、胆、心经;养心补肝,宁心安神,敛汗,生津”。酸枣仁属

于野生资源,主要分布在我国北部的山西、河北等地,约占资源总量的90%。作为

临床治疗失眠之要药,酸枣仁临床使用频率高达67.3%,应用范围涉及到从单味用

药及配伍组方,到中成药、食品原料治疗失眠等领域,年需求量达5000吨以上。

近年来,由于农民盲目的过度采集,主产地酸枣的种群密度下降,产量下降,

导致酸枣仁价格攀升。性状相近、功效相似且价格低廉的云南地方习用药材理枣仁

大量涌入中药材市场,伪充或混充酸枣仁出售;或直接使用理枣仁代替酸枣仁投料

含有酸枣仁的中成药制剂生产中。理枣仁为酸枣仁同科同属植物滇刺枣Ziziphus

mauritianaLam.的干燥成熟种子,始载于《滇南本草》,曰:“滇南甚多。食之,元

气不散,多睡,能调心肾交接,久服令人目清延年”。滇酸枣主要分布在我国云南、

四川、广西等地;缅甸、印度等亚洲国家均有分布和栽培,资源丰富。《云南省中

药材标准》2005年版记载,理枣仁“甘、平,归心、肝经,宁心安神,除烦敛汗”。

酸枣仁和理枣仁作为枣属的两个近缘品种,是否可在临床上代用、混用,一直是中

医药行业关注的热点问题之一。

鉴于此,本研究拟以酸枣仁和理枣仁为研究对象,以药用植物亲缘关系为切入

点,着眼于中药物质基础及其生物效应表达的“性、效、物”3个核心要素及其关

联规律,基于“性味-物质-效应”三元关联研究模式构建理枣仁替代酸枣仁合理性

的多元评价体系,为中药材近缘品种代用品研究提供新的研究策略。

目的:实现酸枣仁和理枣仁从“性味-物质-效应”的逐层递进关联分析对比研

究,为理枣仁作为酸枣仁代用品提供科学依据。

研究内容及方法:1.酸枣仁和理枣仁真实五味表征。利用HPLC-UV-ELSD法对

酸枣仁和理枣仁水提物进行7种成分的含量测定;基于电子舌技术对12批来源不同

的酸枣仁和理枣仁进行检测,表征酸枣仁和理枣仁真实五味;将真实五味与化学成

分进行相关性分析,明确酸枣仁和理枣仁酸味和甘味的物质基础;利用AutoDock

Vina软件将7个化学成分与甜味、酸味、苦味受体进行分子对接,验证相关性分析

的结果,阐明性味和物质的关系。

I

2.酸枣仁和理枣仁改善睡眠药效作用强度比较研究。首先,制备PCPA诱导小

鼠失眠模型,采用旷场实验和睡眠实验初步评价酸枣仁和理枣仁的镇静催眠作用;

其次,制备PCPA诱导大鼠失眠模型,测定大鼠脑中神经递质,血清和结肠炎性因

子IL-1β和IL-10、血清中食欲素A水平,进一步采用综合权重法比较酸枣仁和理枣

仁药效作用强弱。

3.酸枣仁和理枣仁改善睡眠结构和睡眠质量比较研究。制备PCPA诱导大鼠失

眠模型,通过脑电、肌电监测评价酸枣仁和理枣仁对失眠大鼠睡眠结构和睡眠质量

的影响,比较两者治疗失眠的作用特点。

4.酸枣仁和理枣仁改善睡眠药效作用途径比较研究。建立UPLC-Q-TOF-MS非

靶向代谢组学方法,比较酸枣仁和理枣仁对PCPA诱导失眠大鼠血清代谢轮廓的调

控作用;采用16SrRNA测序技术,分析酸枣仁和理枣仁对PCPA诱导失眠大鼠肠道

菌群结构和丰度的影响,并利用GC-MS技术,考察粪便短链脂肪酸的含量。将成

分与药效指标、血清代谢物、肠道菌群、短链脂肪酸进行Pearson相关性分析,阐

明物质和效应的关系。

研究结果:1.酸枣仁中富含生物碱类和皂苷类成分,而理枣仁中黄酮类成分含

量较高;电子舌实验结果表明酸枣仁以苦味和咸味为主,理枣仁以酸味和甘味为主;

相关性分析结果表明,酸枣仁和理枣仁中黄酮类成分是酸味和甘味的化学物质基础,

而生物碱和皂苷类成分是苦味的化学物质基础;分子对接实验进一步验证了皂苷类

成分与苦味受体TA2R4结合能最低,结合能力最强。

2.酸枣仁和理枣仁均能显著减少PCPA失眠小鼠穿越格数,缩短睡眠潜伏期,

延长睡眠时间;均可回调失眠大鼠紊乱的脑神经递质(5-HT、GABA、Glu、DA和

N

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