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DNA的PCR扩增产物电泳结果(EB染色)PCR仪基因芯片(microarraychip)血清学诊断急性期和恢复期双份血清,若恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高≥4倍,有诊断价值。方法:玻片或试管凝集试验、沉淀试验、补体结合试验和冷凝集试验。用已知细菌或其Ag检测相应的Ab及量的多少,作为某些病原菌感染的辅助诊断细菌感染的实验诊断方法主动免疫自然免疫患病、隐性感染人工免疫疫苗、类毒素被动免疫自然免疫胎盘、初乳人工免疫抗毒素、丙球获得性免疫产生的方式基本概念:人工方法给机体接种疫苗、抗血清、淋巴因子等,使机体获得特异性免疫力。常用方法:包括:人工主动免疫,人工被动免疫,过继免疫。人工免疫细菌感染的特异性预防人工主动免疫:将疫苗或类毒素接种于人体疫苗:死疫苗.减毒活疫苗.亚单位疫苗.重组载体疫苗.基因工程疫苗.核酸疫苗类毒素人工被动免疫:注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等免疫制剂.抗毒素血清丙种球蛋白其他免疫制剂:IFN-γ,CSF等。生物制品:用于人工免疫的疫苗、类毒素、免疫血清、细胞制剂以及诊断用品等的生物性制剂。01疫苗:是利用微生物及其代谢产物,经过人工减毒或灭活或基因工程等方法方法制成,用于预防疾病的自动免疫制剂。02活疫苗、死疫苗第一代疫苗:亚单位疫苗、基因工程疫苗第二代疫苗:核酸疫苗第三代疫苗:第8章:细菌感染的检查方法与防治原则Diagnosisandcontrolforbacterialinfection病原菌的检查程序直接涂片镜检初步诊断分离培养生化试验血清学试验动物试验药物敏感试验明确诊断其他检测法抗原检测第一节细菌感染的检查标本的采集和运送原则01避免杂菌污染02运送注意保存03不同期不同标本04用抗菌药物以前05采集病变明显部位06标本必须新鲜07胆囊标本:在外科胆囊摘除手术中,采集胆囊炎患者的胆囊和胆石标本。(二)细菌分离培养与鉴定形态学检查:形态与染色性具有特征的病原菌可直接染色镜检直接涂片镜检不染色法:悬滴法,压滴法暗视野显微镜、相差显微镜染色法革兰染色Gramstain抗酸染色acid-faststain荧光显微镜悬滴法镜检革兰阳性菌革兰阴性菌淋病患者尿道分泌物直接涂片镜检2.分离培养(isolationandcultivation):诊断的金标准,是最可靠的传统诊断技术。病原菌的分离培养:菌落大小形态颜色表面性状透明度溶血性血琼脂平板上分离的菌落取单个菌落,可获得细菌的纯培养物。3.生化试验:针对一个细菌菌落或纯培养物进行鉴定。生化反应糖发酵试验H2S试验枸橼盐利用试验靛基质试验玻片凝集血清学试验:用已知抗体检测未知细菌抗原,进行群和型的鉴别。最简易的方法有玻片凝集等试验。常用动物小鼠豚鼠家兔接种途径皮内皮下腹腔静脉脑内鼻腔灌胃动物实验豚鼠:适用于白喉棒状杆菌、钩端螺旋体、结核分枝杆菌、恙虫病立克次体等病原体的分离培养或毒力检测。方法纸碟法、试管法、小杯法和凹孔法最低抑菌浓度(MIC)最低杀菌浓度(MBC)药物敏感试验(三)病原菌抗原的检测:用已知抗体检测未知抗原EIA酶免疫技术协同凝集试验SPAIF免疫荧光技术CIE对流免疫电泳免疫印迹技术WBELISAdirectindirectFluorescenceMicroscopy检测病原菌核酸分子生物学技术molecularbiologicaltechniques1,核酸杂交(nucleotidehybridization)2,多聚酶链反应(polymerasechainreaction:PCR):一种无细胞的分子克隆技术,能在体外将一个基因或一段DNA序列经过多次循环的DNA复制,在数小时内扩增上百万倍。既便于基因诊断,又利于研究。3,基因芯片(genechips)
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