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T CACM 1027.203—2021 法半夏配方颗粒PCR鉴别.pdfVIP

T CACM 1027.203—2021 法半夏配方颗粒PCR鉴别.pdf

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ICS11.020

CCSC10

团体标准

T/CACM1027.203—2021

法半夏配方颗粒PCR鉴别

PCRidentificationofFabanxiapeifangkeli

2021-11-29发布2021-11-29实施

中华中医药学会发布

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4仪器设备1

5试剂试药1

6鉴别引物序列1

7检验程序2

7.1基本要求2

7.2取样2

7.3DNA提取2

7.4PCR扩增2

7.5扩增产物检测3

8结果判定3

9结果报告3

9.1一般要求3

9.2检测报告3

10质量保证3

11废弃物处理4

附录A(规范性)检测用仪器设备和试剂试药5

附录B(资料性)法半夏配方颗粒PCR反应体系的建立7

参考文献10

法半夏配方颗粒PCR鉴别

1范围

本文件规定了使用聚合酶链式反应(PCR)鉴别法半夏配方颗粒的通用方法和要求。

本文件适用于法半夏配方颗粒的鉴别。

本文件不适用于正伪混合样品的鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文

件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注明日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)

适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

T/CACM1027.2—2016中药分子鉴定通则第2部分:中药提取物与中成药

中华人民共和国药典(四部)

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

法半夏配方颗粒fabanxiapeifangkeli

为天南星科植物半夏Pinelliaternate(Thunb)Breit.的干燥块茎经炮制并按标准汤剂的主要质

量指标加工制成的配方颗粒。

4仪器设备

仪器设备应符合附录A的要求。

5试剂试药

试剂试药应符合附录A的要求。

6鉴别引物序列

BX-123aF:5-CGGCGGAGGCACGCAAT-3

BX-123R:5-AATTCACACCACGTATCGCATTT-3

7检验程序

7.1基本要求

为防止交叉污染,收样、取样、粉碎、DNA提取和核酸扩增与产物检测应在不同操作间或在同一操

作间不同隔离区域进行,进入各区域应严格按照单一方向进行,即样品制备区→核酸制备区→扩增区

→检测区。

7.2取样

送检样品总量应不低于10g,每批分为3等份,1/3供实验室分析用,另1/3供复核用,其余1/3

留样保存。收样时应检查包装的完整性,并在样品袋上贴上标签,填写采集数据表。对商品包装和送

样说明进行拍照记录,照片随样品一起备档。送检样品抽样方法依照《中华人民共和国药典》(四部)

通则0211进行取样。

7.3DNA提取

送检样品DNA提取步骤如下:

a)取样品1g,粉碎成粉末;

b)取上述粉末0.02g,置2mL离心管中,加入细胞核裂解液300μL、乙二胺四乙酸二钠溶液

50μL、蛋白酶K溶液20μL、RNA酶A溶液5μL,充分涡旋震荡混匀3min,56℃下水浴60min;

c)离心(12000×g)5min后,吸取上清液250μL至一新的2mL离心管中,加入裂解缓冲液

250

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该用户很懒,什么也没介绍

领域认证该用户于2023年05月13日上传了注册安全工程师、一级消防工程师

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