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指导老师:权富生团队成员:张嘉皓姚畅王义乐杨洁CARM1在牛核移植胚胎早期发育中的作用大学生创新项目答辩汇报PPT模板下载:行业PPT模板:节日PPT模板:素材下载:PPT背景图片:图表下载:优秀PPT下载:教程:Word教程:教程:资料下载:课件下载:范文下载:试卷下载:教案下载:研究背景1研究目标2研究内容3技术路线4资源及需求5研究背景体细胞核移植技术依然存在着很多问题。研究普遍认为体细胞核在卵母细胞质中不完全的表观遗传重编程是引起这些问题的一个重要原因。组蛋白甲基化是一种发生在组蛋白精氨酸和赖氨酸残基上的共价修饰,由组蛋白甲基转移酶(HMT)催化。其中对赖氨酸甲基化修饰的研究较为广泛,而关于精氨酸甲基化结合蛋白的研究却较少。本研究目的通过对蛋白精氨酸甲基转移酶(CARM1)在牛卵母细胞重编程及核移植早期胚胎发育中作用的研究,揭示组蛋白精氨酸甲基化修饰在表观遗传调控中的作用机制。研究目标(1)研究CARM1通过干扰抑制表达,对核移植早期胚胎发育以及胚胎质量的影响。(2)研究CARM1干扰对早期胚胎不同时期总体甲基化水平及H3R17,H3R26位点甲基化的影响。(3)通过以上研究分析,揭示组蛋白精氨酸甲基化修饰在表观遗传调控中的作用机制。研究内容(1)设计合成SiRNA-CARM1片段,优化干扰条件。(2)研究CARM1基因干扰对早期胚胎发育的影。(3)研究CARM1基因干扰对胚胎甲基化水平影响及对H3R17,H3R26位点甲基化的影响。合成SiRNA-CARM1显微注射牛胎儿成纤维细胞检测干扰效率,寻找合适的注射剂量对激活后的SCNT胚胎进行显微注射统计一段时间后的胚胎发育率,对SCNT胚胎细胞数和囊胚凋亡率进行统计分析,定量PCR分析三组胚胎发育相关和凋亡相关基因的相对表达水平,与control-NT,NON-targeting-NT及IVF胚胎比较。分析对早期胚胎不同时期总体甲基化水平的影响对H3R17,H3R26位点进行甲基化染色,研究其对特定位点甲基化修饰的影响统计结果,数据分析技术路线4科创平台本项目将在西北农林科技大学农业部动物生物技术重点开放实验室完成。本实验室承担多项国家重大科研项目,具有进行胚胎体外操作、细胞体外培养、基因表达检测以及载体构建的实验平台,完成本项目的一切实验设备条件具备。实验室也可以为本项目提供一定资金支持与技术指导。队员能力本团队队员大学期间均无任何挂科经历半数以上成员通过英语六级项目主持人曾主持过本实验室的自主实验项目大二成员均具有保研资格,其中两人计划在本实验室直博小组成员均拥有较好的实验技术和文献搜集能力,具备合格知识基础预算需求8200元实验经费,超出限额部分由实验室基金补充。仪器场所资金支持知识储备专家指导团队协作实验能力实验成功条件

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