《实验动物 小鼠脊髓损伤模型制备方法》（征求意见稿）.docx

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T/GXAQXXXX—2025

实验动物小鼠脊髓损伤模型制备方法

1范围

本文件界定了实验动物小鼠脊髓损伤模型制备方法的相关术语和定义、规定了基本条件、实验鼠选择、造模前准备、麻醉、SCI造模及术后护理。

本文件适用于小鼠脊髓损伤模型制备，在饲养环境中，应按照标准对小鼠脊髓损伤模型进行检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

RB/T210实验室能力验证动物检疫领域技术要求

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB14922实验动物微生物、寄生虫学等级及监测

GB14925实验动物环境和设施

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27416实验动物机构质量和能力的通用要求

GB/T39760实验动物安乐死指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

脊髓损伤SCI（spinalcordinjury）

3.2

BMS评分

采用BassoMouseScale评分系统评估运动功能恢复情况。

3.3

假手术组（Sham）

小鼠仅行椎板切除手术，未真正造成SCI，提供标准饮食和饮水。

3.4

对照组（Control）

小鼠行椎板切除手术后，接受打击法，击打脊髓，造成SCI，提供标准饮食和饮水。

4基本条件

4.1人员、设备、繁殖与生产、使用、福利伦理

应按GB/T34791要求执行。

4.2饲料的营养成分

应符合GB14924.3的要求。

4.3实验动物的环境及设施

应符合GB14925的要求。

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5实验鼠选择

5.1引种

应按GB/Z34792规定执行。

5.2隔离

应放入规定的隔离检疫室或隔离器中，隔离观察2天后，无异常情况的转入动物实验室。如有异常的小鼠，应进行必要的微生物学质量检测。

5.3性别

应选择同一性别（如雄性）以减少性别对实验结果的影响。

5.4年龄

应选择相同年龄段（如6-8周龄），以确保生理状态一致。

5.5分组

选取了6至8周龄的雌性C57BL/6小鼠，将其随机划分为两个不同的实验组别(每组≥6只)。

5.5.1假手术组

5.5.2对照组

5.6饲养管理

5.6.1日常饲养应根据地区、季节、设施设备条件的不同制定切实可行的管理操作规程。

5.6.2人员进入动物设施应按照进入该级别动物设施的操作规程进行。

5.6.3工作时留意是否有疾病征兆或死亡小鼠，并及时处理进行诊断。

5.7微生物、寄生虫学质量控制

应按照GB14922中规定执行，监测工作应由专业人员完成。

6造模前准备

6.1环境和设施

应符合GB14925的要求。

6.2仪器和设备

6.2.1脊髓损伤打击器（HI-0400）。

6.2.2经灭菌的常规手术器械，包括手术刀柄、刀片、止血钳、手术剪、手术镊、肠钳、持针器、缝针、缝线、创巾、敷料、绑定绳、毛巾等若干。

6.2.3去毛器。

6.2.4一次性5mL和10mL灭菌注射器若干。

6.2.5保温垫。

6.3药品

6.3.1麻醉镇痛药品。

6.3.1.1异氟烷。

6.3.1.2盐酸利多卡因注射液。

6.3.1.3丁丙诺啡。

6.3.2常规药品

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6.3.2.1碘伏。

6.3.2.2酒精。

6.3.2.3生理盐水。

6.3.2.4广谱抗生素（如头孢类等）。

6.3.2.5新洁尔灭溶液。

7麻醉

7.1麻醉方法

采用吸入麻醉结合局部麻醉，应符合GB/T27416的规定。

7.2步骤

7.2.1手术前禁食12h。

7.2.2麻醉前检查呼吸麻醉设备，确认监护设备的功能完整性以及麻醉机的气密性。

7.2.3称重，记录后将小鼠放置麻醉盒，麻醉实验动物使用标准吸入性麻醉剂异氟烷，使用浓度是3%的异氟烷和氧气的混合气体进行吸入诱导麻醉，并将小鼠以卧位稳定地放置于洁净的实验手术板上并给予异氟烷持续麻醉（2％）。

7.2.4局部麻醉采取腹腔注射与切口线性阻滞麻醉。根据体重换算出麻醉剂的剂量，麻醉剂用量为

0.2mg/kg。注射器抽取所需的麻醉剂，然后将其前后肢固定并进行麻醉，进针角度为45°,插入小鼠腹腔，进入一瞬间出现落空感。应防止注射针刺入内脏，针头进入回抽注射器未见血液后缓慢匀速推入麻醉剂。推注盐酸利多卡因（0