《基于聚合酶基因序列的HIV-1耐药突变分析技术规范（征求意见稿）》编制说明.docx

《基于聚合酶基因序列的

HIV-1耐药突变分析技术规范》

编制说明

一、工作简况

（一）项目背景及目的意义

随着抗逆转录病毒治疗（ART）的推广，接受抗病毒治疗的HIV感染者人数不断增加。HIV具有高度的变异性，在

药物压力下易产生耐药基因突变而出现耐药毒株，长期服药难以保持良好的依从性，增加了耐药毒株产生的风险。耐药毒株可进一步传播，导致耐药毒株的感染。HIV耐药使病毒对药物的敏感性下降并可导致治疗失败，影响抗病毒治疗及暴露前后预防的效果，是艾滋病防治面临的严峻挑战。准确的HIV耐药检测方法是防控耐药的有力工具，基于聚合酶基因序列的基因型耐药检测是目前主要使用的HIV耐药检测方法，检测流程包括样品采集及处理、核酸提取及纯化、聚合酶基因片段扩增、测序及序列编辑、耐药突变的确定及耐药解释等，操作复杂、影响因素多。为了得到准确的检测结果，检测方法、步骤和流程应规范化和标准化，并采取覆盖检测全过程的质量保证和质量控制措施。本标准旨在规范基于聚合酶基因序列的HIV基因型耐药检测及质量控制方法，以指导相关实验室获得准确的检测结果。

（二）任务来源

2025年1月，由粤港澳大湾区标准创新联盟批准团体标准《基于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒1型基因型耐药检测技术规范》立项。本标准由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心提出，粤港澳大湾区标准创新联盟归口，标准编制组由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心、军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所、中国科学院微生物研究所、中国医科大学附属第一医院、浙江省疾病预防控制中心、北京市疾病预防控制中心、四川省疾病预防控制中心、上海市疾病预防控制中心、广西壮族自治区疾病预防控制中心、江苏省疾病预防控制中心、湖南省疾病预防控制中心、广州医科大学附属市八医院、香港大学艾滋病研究所、澳门仁伯爵综合医院、澳门卫生局、深圳华大智造科技股份有限公司共同组成。

二、标准编制原则

1.依法原则

以现行法律法规的规定和相关标准为基础。本标准中的约束性条款首先应与这些法律法规、强制性标准的要求保持一致，并在必要情况下予以细化和延伸，但总体上不得有悖于法律法规和强制性标准的要求。

2.实用性原则

标准的编写结合了实验室样本要求、核酸提取及扩增、序列分析、耐药性分析和质量控制等耐药检测的实际情况，可指导各实验室和检测机构建立自己的质检标准和规范。

三、标准编制过程

1.前期准备阶段

2024年11月，参编单位成立标准编制组。标准编制组对目录、方法内容进行讨论并加以整理分析，起草标准的初步框架。

2024年12月，标准编制组召开第一次工作会议，对标准制定的目的意义、标准框架进行讨论，并根据会议结论形成标准草案。

2.标准立项阶段

2025年1月14日，粤港澳大湾区标准创新联盟批准《基于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒1型基因型耐药检测技术规范》大湾区团体标准的立项。

3.标准起草阶段

2025年1月24日，标准编制组召开第二次起草组会议，参会成员对标准草案框架结构和各章节细节内容等展开讨论，同时结合实际实验方法，对标准内容进一步完善，会后形成了标准工作组讨论稿（一稿）。

2025年1月至2月，标准编制组开展内部调研，期间各起草单位对标准整体框架、主要技术指标、试验方法以及术语定义提出建设性意见，形成了标准工作组讨论稿（二稿）。

2025年2月25日，标准编制组召开第三次起草组会议，主要研究讨论各项内容的准确性和实用性。编制组根据会议讨论结果对标准内容进一步完善。此外，对标准的内容表述和格式做了进一步规范，并形成标准征求意见稿。

四、标准主要内容

（一）范围

本文件规定了采用双脱氧链末端终止法或高通量测序技术获得HIV-1聚合酶基因序列，并进行HIV-1基因型耐药检测的方法，以及相应的质量控制程序。本文件适用于基于聚合酶基因序列进行人HIV-1基因型耐药检测的实验室。

（二）规范性引用文件

本章节主要包括了标准文本中规范性引用的文件。

（三）术语和定义

本章节主要包括了人免疫缺陷病毒和耐药等术语和定义。

（四）基本要求

本章节给出了样本要求，规定了样本类型，并对不同样本类型给出具体的保存措施。

（五）试验方法原则

试验方法遵循基本原则、专业性、真实性原则。Sanger法测序的方法参照GB/T34265Sanger法测序技术指南；高通量基因测序的方法参照GB/T30989高通量基因测序技术规程；实验室生物安全参照GB/T19489实验室生物安全通用要求；艾滋病诊断参照WS293-20