研究生基因表达调控熊.pptVIP

DNA拓扑结构变化22%组蛋白变化40%DNA碱基修饰变化38%对核酸酶敏感（二）活性染色体结构变化1.对核酸酶敏感转录活跃区域对核酸酶敏感度增加DNA开放的松散结构使参与转录的RNA聚合酶和蛋白质转录因子能接近该区域，这些区域对DNaseⅠ敏感，称为DNaseⅠ高敏感点（hypersensitivesite）。这种高敏感点常出现在转录基因的5＇侧区（5＇flankingregion）、3＇末端，多在调控蛋白结合位点的附近，有利于调控蛋白的结合而促进转录。活化基因常有超敏位点，位于调节蛋白结合位点附近。2.DNA拓扑结构变化天然双链DNA均以负性超螺旋构象存在；基因活化后RNA-pol正超螺旋负超螺旋转录方向CpG岛——甲基化常发生在某些基因的5’侧翼区的CpG序列真核DNA约有5%的胞嘧啶被甲基化，3.DNA碱基修饰变化甲基化范围与基因表达程度呈反比。实验表明这段序列甲基化可使其后的基因不能转录，甲基化可能阻碍转录因子与DNA特定部位的结合从而影响转录。如果用基因打靶的方法除去主要的DNA甲基化酶，小鼠的胚胎就不能正常发育而死亡，可见DNA的甲基化对基因表达调控是重要的。组蛋白的作用组蛋白是碱性蛋白质，带正电荷，可与DNA链上带负电荷的磷酸基相结合，从而遮蔽了DNA分子，妨碍了转录，可能扮演了非特异性阻遏蛋白的作用；染色质中的非组蛋白成分具有组织细胞特异性，可能消除组蛋白的阻遏，起到特异性的去阻遏促转录作用。4.组蛋白变化核基因转录调节

---主要调节环节在转录起始基因转录调节特点

σ因子决定RNA聚合酶识别特异性

操纵子模型的普遍性

阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性σ因子与启动子的作用模式转录起始的调控RNA聚合酶全酶α2ββ’σ在原核生物的发育分化过程中，不同基因的有序表达是由于不同σ因子在不同时间产生并发挥作用而引起的。核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzyme)???????????目前发现多种?因子常规基因表达采用的是?70（分子量70kD）热休克反应：细菌中:当细菌受到热应激，则由?32启动另一套转录，所生成的产物称为热休克蛋白（Hsp），Hsp编码的基因称为热休克基因（hsp）真核生物中也存在热休克基因只是功能各异。（二）乳糖操纵子调节机制1、乳糖操纵子(lacoperon)的结构调控区CAP结合位点启动序列操纵序列结构基因Z：β-半乳糖苷酶Y：透酶A：乙酰基转移酶ZYAOPDNAmRNA阻遏蛋白IDNAZYAOPpol没有乳糖存在时2、阻遏蛋白的负性调节阻遏基因mRNA阻遏蛋白有乳糖存在时IDNAZYAOPpol启动转录mRNA乳糖半乳糖β-半乳糖苷酶++++转录无葡萄糖，cAMP浓度高时有葡萄糖，cAMP浓度低时3、CAP的正性调节ZYAOPDNACAPCAPCAPCAPCAPCAP当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用；如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。葡萄糖对lac操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolicrepression)。4、协调调节低半乳糖时mRNA高半乳糖时葡萄糖低cAMP浓度高葡萄糖高cAMP浓度低RNA-polOOOO依赖Rho(ρ)因子的转录终止非依赖Rho因子的转录终止转录终止的调控0102ATP依赖Rho因子的转录终止2.非依赖Rho因子的转录终止5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`RNA5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3?DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构RNA-pol茎环结构使转录终止的机理使RNA聚合酶变